BC-3

BC-3 šūnu līnija ir cilvēka primārās efūzijas limfomas (PEL) modelis, kas iegūts no HIV negatīva pacienta pleiras efūzijas. Tā pārstāv retu B šūnu nehodžkina limfomas apakštipu, kas parasti izpaužas kā limfomatozas efūzijas ķermeņa dobumos, piemēram, pleirā, perikardā vai peritoneumā, bieži vien bez konstatējamiem cietiem audzējiem. BC-3 atšķiras ar to, ka tā ir inficēta tikai ar Kapoši sarkomai asociēto herpesvīrusu (KSHV vai HHV-8) un tajā pilnībā nav Epšteina-Barra vīrusa (EBV), kas to atšķir no vairuma citu PEL šūnu līniju, kuras parasti ir inficētas ar abiem vīrusiem.

Imunofenotipiski BC-3 šūnas ekspresē leikocītu kopējo antigēnu (CD45), bet tām trūkst klasisko B šūnu (piem., CD19, CD20, CD21, CD22) un T šūnu (piem., CD2, CD3, CD4, CD5, CD8) ciltskoka marķieru, kas atbilst PEL nediferencētajam imunofenotipam. Tomēr tām ir novērojama mainīga aktivācijas marķieru, piemēram, CD30, CD38, CD54 un HLA-DR, ekspresija. Ģenotipiski BC-3 uzrāda klonālas imūnglobulīna gēnu pārkārtojumus, kas liecina par B šūnu izcelsmi, bet tajās nav c-myc onkogēna pārkārtojumu. Svarīgi, ka Southern blot un PCR analīzes apstiprināja neskartas ~170 kb KSHV genoma klātbūtni, un elektronu mikroskopija parādīja herpesvīrusam līdzīgas kapsīdas, apstiprinot šo līniju kā produktīvu infekciozo KSHV daļiņu avotu.

BC-3 ir iekļauts LL-100 leikēmijas un limfomas šūnu līniju panelī un transkriptomiskajās analīzēs izceļas kopā ar citiem PEL modeļiem. Tas izrāda PEL raksturīgo gēnu ekspresiju, piemēram, PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 un S100A ģimenes locekļus. Šie marķieri atspoguļo pēcgerminālā centra B šūnu fenotipu un uzsver BC-3 lietderību kā bioloģiski nozīmīgu modeli KSHV patogēnēzes, PEL bioloģijas un terapeitisko stratēģiju izpētei, kas vērstas uz KSHV saistītiem ļaundabīgiem audzējiem.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu