BC-3

Η κυτταρική σειρά BC-3 αποτελεί μοντέλο πρωτογενούς λεμφώματος εξιδρώματος (PEL) ανθρώπινης προέλευσης, το οποίο προέρχεται από πλευριτική συλλογή ασθενούς αρνητικού στον HIV. Αντιπροσωπεύει έναν σπάνιο υποτύπο μη Hodgkin λεμφώματος Β-κυττάρων, ο οποίος εμφανίζεται συνήθως ως λεμφοματώδης συλλογή σε σωματικές κοιλότητες όπως ο υπεζωκότας, το περικάρδιο ή το περιτόναιο, συχνά χωρίς ανιχνεύσιμες συμπαγείς όγκους. Η BC-3 διακρίνεται από την αποκλειστική μόλυνσή της με τον ιό του έρπητα που σχετίζεται με το σάρκωμα Kaposi (KSHV ή HHV-8) και την πλήρη απουσία του ιού Epstein-Barr (EBV), ένα χαρακτηριστικό που την ξεχωρίζει από τις περισσότερες άλλες κυτταρικές σειρές PEL, οι οποίες συνήθως παρουσιάζουν διπλή μόλυνση.

Από ανοσοφαινοτυπική άποψη, τα κύτταρα BC-3 εκφράζουν το κοινό αντιγόνο των λευκοκυττάρων (CD45) αλλά στερούνται των κλασικών δεικτών γενεαλογίας των Β-κυττάρων (π.χ. CD19, CD20, CD21, CD22) και των Τ-κυττάρων (π.χ. CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), κάτι που συνάδει με τον αδιαφοροποίητο ανοσοφαινοτύπο του PEL. Ωστόσο, παρουσιάζουν μεταβλητή έκφραση δεικτών ενεργοποίησης όπως τα CD30, CD38, CD54 και HLA-DR. Γενετικά, το BC-3 εμφανίζει κλωνικές αναδιατάξεις γονιδίων ανοσοσφαιρίνης που υποδηλώνουν προέλευση από Β-κύτταρα, αλλά στερείται αναδιατάξεων του ογκογονιδίου c-myc. Είναι σημαντικό ότι οι αναλύσεις Southern blot και PCR επιβεβαίωσαν την παρουσία ενός άθικτου γονιδιώματος KSHV ~170 kb, ενώ η ηλεκτρονική μικροσκοπία κατέδειξε καψίδια τύπου ερπητοϊού, επικυρώνοντας τη σειρά ως παραγωγική πηγή μολυσματικών σωματιδίων KSHV.

Το BC-3 περιλαμβάνεται στο πάνελ LL-100 κυτταρικών σειρών λευχαιμίας και λεμφώματος και ομαδοποιείται ξεχωριστά με άλλα μοντέλα PEL σε μεταγραφωματικές αναλύσεις. Παρουσιάζει έκφραση γονιδίων χαρακτηριστικών του PEL, όπως τα PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 και μέλη της οικογένειας S100A. Αυτοί οι δείκτες αντανακλούν έναν φαινότυπο Β-κυττάρων μετά το βλαστικό κέντρο και υπογραμμίζουν τη χρησιμότητα του BC-3 ως βιολογικά σχετικού μοντέλου για τη μελέτη της παθογένειας του KSHV, της βιολογίας του PEL και των θεραπευτικών στρατηγικών που στοχεύουν κακοήθειες που σχετίζονται με τον KSHV.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης