Skip to content
BC-3
Tissue
Tràn dịch màng phổi
Disease
U lympho do tràn dịch nguyên phát
Synonyms
BC3

Documents

BC-3

Cell line · Product number 305748

The BC-3 cell line is a human primary effusion lymphoma (PEL) model derived from the pleural effusion of an HIV-negative patient. It represents a rare sub...

€700.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào BC-3 là một mô hình u lympho tràn dịch nguyên phát (PEL) ở người, được phân lập từ dịch màng phổi của một bệnh nhân âm tính với HIV. Đây là một thể hiếm của u lympho không Hodgkin tế bào B, thường biểu hiện dưới dạng tràn dịch lympho ở các khoang cơ thể như màng phổi, màng tim hoặc màng bụng, thường không kèm theo khối u rắn có thể phát hiện được. BC-3 được phân biệt bởi sự nhiễm trùng độc quyền với virus herpes liên quan đến sarcoma Kaposi (KSHV hoặc HHV-8) và sự vắng mặt hoàn toàn của virus Epstein-Barr (EBV), một đặc điểm khiến nó khác biệt so với hầu hết các dòng tế bào PEL khác, vốn thường bị nhiễm kép.

Về mặt miễn dịch hình thái, các tế bào BC-3 biểu hiện kháng nguyên chung của bạch cầu (CD45) nhưng thiếu các dấu hiệu dòng tế bào B cổ điển (ví dụ: CD19, CD20, CD21, CD22) và tế bào T (ví dụ: CD2, CD3, CD4, CD5, CD8), phù hợp với hình thái miễn dịch chưa biệt hóa của PEL. Tuy nhiên, chúng biểu hiện biến đổi các dấu hiệu hoạt hóa như CD30, CD38, CD54 và HLA-DR. Về mặt gen, BC-3 thể hiện sự sắp xếp gen miễn dịch globulin theo kiểu dòng, cho thấy nguồn gốc từ tế bào B, nhưng thiếu sự sắp xếp gen ung thư c-myc. Điều quan trọng là, các phân tích Southern blot và PCR đã xác nhận sự hiện diện của bộ gen KSHV nguyên vẹn ~170 kb, và kính hiển vi điện tử đã chứng minh sự hiện diện của các vỏ virus giống herpes, xác nhận dòng tế bào này là nguồn sản xuất các hạt KSHV lây nhiễm.

BC-3 được bao gồm trong bảng LL-100 các dòng tế bào ung thư máu và u lympho, và phân cụm rõ rệt với các mô hình PEL khác trong phân tích biểu hiện gen. Nó biểu hiện các gen đặc trưng của PEL như PRDM1/BLIMP1, IL-10, SLAMF7 và các thành viên của gia đình S100A. Các dấu hiệu này phản ánh kiểu hình tế bào B sau trung tâm sinh sản và nhấn mạnh tính hữu ích của BC-3 như một mô hình có liên quan về mặt sinh học để nghiên cứu bệnh sinh KSHV, sinh học PEL và các chiến lược điều trị nhắm vào các bệnh ác tính liên quan đến KSHV.

Tissue
Tràn dịch màng phổi
Disease
U lympho do tràn dịch nguyên phát
Applications
Miễn dịch học
Synonyms
  • BC3

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
Tế bào lymphoblast
Doubling time
khoảng 50–60 giờ

04Identifiers

Citation
BC-3 (Mã sản phẩm Cytion 305748)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1080

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD30 dương tính; CD38 dương tính; CD45 dương tính; CD54 dương tính; CD71 dương tính; HLA-DR dương tính; EMA dương tính (kháng nguyên màng biểu mô); CD2 âm tính; CD3 âm tính; CD4 âm tính; CD5 âm tính; CD8 âm tính; CD19 âm tính; CD20 âm tính; CD21 âm tính; CD22 âm tính
Mutational profile
Biến dị: Thiếu hụt gen, gen CDKN2A, đồng hợp tử

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 20% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Không có
Seeding density
2,5 đến 10 × 10⁵ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Với vai trò là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh (bao gồm huyết thanh bò non [FBS]) + 5% DMSO để đảm bảo khả năng sống sót sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), chứa các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa đã được tối ưu hóa nhằm nâng cao tỷ lệ phục hồi và giảm thiểu căng thẳng do quá trình đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
85 năm
Ethnicity
Người da trắng