
- Tissue
- Poumon
- Disease
- Adénocarcinome
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06
Documents
Cellules Calu-6
Cell line · Product number 300135
The Calu-6 cell line is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line derived from the pleural effusion of a 61-year-old male patient. Establish...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire Calu-6 est une lignée cellulaire humaine issue d’un carcinome pulmonaire non à petites cellules (CPNPC), dérivée de l’épanchement pleural d’un patient de sexe masculin âgé de 61 ans. Créée en 1975, cette lignée cellulaire constitue un modèle essentiel dans la recherche sur le cancer du poumon. Les cellules Calu-6 présentent une morphologie épithéliale distincte et ont été largement utilisées pour étudier la biologie du cancer du poumon, notamment les mécanismes de métastase, la résistance aux médicaments et le microenvironnement tumoral. Ces cellules sont particulièrement réputées pour leur capacité à former des tumeurs dans des modèles de xénogreffes, ce qui les rend très précieuses pour les études in vivo sur la croissance tumorale et la réponse aux traitements.
La lignée Calu-6 se caractérise par un taux élevé de mutation du gène KRAS, fréquente dans le CPNPC, et constitue un modèle pertinent pour étudier le rôle de cet oncogène dans le cancer du poumon. Elle présente également plusieurs anomalies cytogénétiques typiques des cellules cancéreuses, telles que des caryotypes complexes et une aneuploïdie, ce qui contribue à son utilisation dans les études génétiques. Les recherches menées à l’aide de la lignée cellulaire Calu-6 ont permis de mieux comprendre les mécanismes cellulaires du cancer du poumon et de développer des stratégies thérapeutiques. Sa croissance vigoureuse en culture et sa capacité à reproduire les aspects cliniques du cancer du poumon en font une ressource indispensable à la recherche en oncologie.
- Tissue
- Poumon
- Disease
- Adénocarcinome
- Metastatic site
- Épanchement pleural
- Synonyms
- CaLu-6
- CALU-6
- Calu.6
- Calu 6
- Calu6
- CALU6
- CaLu-06
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Tumourigenic
- Oui, chez les souris nues. Il forme un carcinome peu différencié.
- Karyotype
- Le nombre chromosomique de la lignée souche est hypotriploïde et la composante 2S représentait 5,8 %. Le nombre chromosomique modal est de 59. Quatorze chromosomes marqueurs (constitutifs) étaient communs à la plupart des métaphases S. Aucun chromosome Y n’a été détecté dans la préparation colorée au QM.
04Identifiers
- Citation
- Calu-6 (numéro de catalogue Cytion 300135)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0236
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 négatif
- Isoenzymes
- Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, produit de la fréquence phénotypique : 0,0031
- Mutational profile
- Les cellules CaLu-6 présentent une mutation au codon 61 du gène KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Aucune mutation des gènes NRAS ou BRAF n'a été détectée.
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- Une concentration de 2 × 10⁴ cellules/cm² permettra d'obtenir une monocouche confluence à 90 % en environ 4 jours.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 48 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 61 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes