Přejít na obsah
Buňky Calu-6
Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumenty

Buňky Calu-6

Cell line · Číslo výrobku 300135

Buněčná linie Calu-6 je lidská buněčná linie nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) odvozená z pleurálního výpotku 61letého pacienta mužského pohlaví. Stanovení...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Calu-6 je lidská buněčná linie nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) odvozená z pleurálního výpotku 61letého muže. Tato buněčná linie byla založena v roce 1975 a je zásadním modelem pro výzkum rakoviny plic. Buňky Calu-6 vykazují výraznou epiteliální morfologii a byly hojně využívány ke studiu biologie karcinomu plic, včetně mechanismů metastazování, rezistence na léky a nádorového mikroprostředí. Tyto buňky jsou obzvláště známé svou schopností vytvářet nádory v xenograftových modelech, což je činí velmi cennými pro in vivo studie růstu nádorů a reakce na léčbu.

Calu-6 se vyznačuje vysokou mírou mutace KRAS, která je běžná u NSCLC, a představuje vhodný model pro studium úlohy tohoto onkogenu u karcinomu plic. Buněčná linie rovněž vykazuje několik cytogenetických anomálií typických pro nádorové buňky, jako jsou komplexní karyotypy a aneuploidie, což přispívá k jejímu využití v genetických studiích. Výzkum využívající buněčnou linii Calu-6 pomohl pochopit buněčné mechanismy rakoviny plic a vyvinout terapeutické strategie. Její robustní růst v kultuře a schopnost napodobovat klinické aspekty rakoviny plic z ní činí nepostradatelný zdroj v onkologickém výzkumu.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, na nahých myších. Tvoří špatně diferencovaný karcinom
Karyotyp
Počet kmenových chromozomů je hypotriploidní a složka 2S se vyskytuje v 5,8 %. Modální počet chromozomů je 59. Čtrnáct markerových chromozomů (konstitutivních) bylo společných pro většinu S metafází. V preparátu obarveném QM nebyl zjištěn žádný chromozom Y.

04Identifikátory

Citace
Calu-6 (katalogové číslo Cytion 300135)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 negativní
Isoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, produkt fenotypové frekvence: 0.0031
Mutační profil
Buňky CaLu-6 nesou mutaci v kodonu 61 KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Mutace NRAS BRAF nebyla zjištěna.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2 vytvoří za přibližně 4 dny 90% konfluentní monovrstvu.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
61 let
Etnická příslušnost
Kavkazský