Przejdź do treści
Komórki Calu-6
Chusteczka
Płuco
Choroba
Gruczolakorak
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumenty

Komórki Calu-6

Cell line · Numer produktu 300135

Linia komórkowa Calu-6 to ludzka linia komórkowa niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC) wyhodowana z wysięku opłucnowego 61-letniego pacjenta płci męskiej. Ustanowiono...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa Calu-6 to ludzka linia komórkowa niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC) pochodząca z wysięku opłucnowego 61-letniego mężczyzny. Założona w 1975 roku, ta linia komórkowa była krytycznym modelem w badaniach nad rakiem płuc. Komórki Calu-6 wykazują wyraźną morfologię nabłonkową i były szeroko wykorzystywane do badania biologii raka płuc, w tym mechanizmów przerzutów, oporności na leki i mikrośrodowiska guza. Komórki te są szczególnie znane ze swojej zdolności do tworzenia guzów w modelach ksenoprzeszczepów, co czyni je bardzo cennymi w badaniach in vivo nad wzrostem guza i odpowiedzią na terapeutyki.

Calu-6 charakteryzuje się wysokim poziomem mutacji KRAS, powszechnej w NSCLC, i stanowi odpowiedni model do badania roli tego onkogenu w raku płuc. Linia komórkowa wykazuje również kilka anomalii cytogenetycznych typowych dla komórek nowotworowych, takich jak złożone kariotypy i aneuploidia, co przyczynia się do jej wykorzystania w badaniach genetycznych. Badania wykorzystujące linię komórkową Calu-6 pomogły w zrozumieniu mechanizmów komórkowych raka płuc oraz w opracowaniu strategii terapeutycznych. Jej silny wzrost w hodowli i zdolność do naśladowania klinicznych aspektów raka płuc sprawiają, że jest ona niezbędnym zasobem w badaniach onkologicznych.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Gruczolakorak
Miejsce przerzutów
Wysięk opłucnowy
Synonimy
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy. Tworzy słabo zróżnicowanego raka
Karyotyp
Liczba chromosomów linii macierzystej jest hipotriploidalna, a składnik 2S występuje w 5,8%. Modalna liczba chromosomów wynosi 59. Czternaście chromosomów markerowych (konstytutywnych) było wspólnych dla większości metafaz S. W preparacie barwionym QM nie wykryto chromosomu Y.

04Identyfikatory

Źródło
Calu-6 (numer katalogowy Cytion 300135)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
P53 ujemny
Izoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produkt Częstotliwości Fenotypu: 0.0031
Profil mutacji
Komórki CaLu-6 są nosicielami mutacji w kodonie 61 KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Nie wykryto mutacji NRAS lub BRAF.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie 90% zlewającej się monowarstwy w ciągu około 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
61 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski