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Células Calu-6
Tissue
Pulmão
Disease
Adenocarcinoma
Metastatic site
Derrame pleural
Synonyms
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

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Células Calu-6

Cell line · Product number 300135

The Calu-6 cell line is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line derived from the pleural effusion of a 61-year-old male patient. Establish...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

A linhagem celular Calu-6 é uma linhagem de carcinoma pulmonar de células não pequenas (NSCLC) derivada do derrame pleural de um paciente do sexo masculino de 61 anos. Criada em 1975, essa linhagem celular tem sido um modelo fundamental na pesquisa sobre o câncer de pulmão. As células Calu-6 apresentam uma morfologia epitelial distinta e têm sido amplamente utilizadas para estudar a biologia do câncer de pulmão, incluindo mecanismos de metástase, resistência a medicamentos e o microambiente tumoral. Essas células são particularmente conhecidas por sua capacidade de formar tumores em modelos de xenoenxertos, o que as torna altamente valiosas para estudos in vivo do crescimento tumoral e da resposta a tratamentos terapêuticos.

A Calu-6 é caracterizada por um alto nível de mutação no gene KRAS, comum no NSCLC, e fornece um modelo relevante para o estudo do papel desse oncogene no câncer de pulmão. A linhagem celular também apresenta várias anomalias citogenéticas típicas de células cancerosas, como cariótipos complexos e aneuploidia, o que contribui para seu uso em estudos genéticos. Pesquisas que utilizam a linhagem celular Calu-6 têm ajudado na compreensão dos mecanismos celulares do câncer de pulmão e no desenvolvimento de estratégias terapêuticas. Seu crescimento robusto em cultura e a capacidade de simular aspectos clínicos do câncer de pulmão a tornam um recurso indispensável na pesquisa oncológica.

Tissue
Pulmão
Disease
Adenocarcinoma
Metastatic site
Derrame pleural
Synonyms
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Sim, em camundongos nude. Forma um carcinoma pouco diferenciado
Karyotype
O número cromossômico da linhagem-tronco é hipotriploide, e o componente 2S apresentou 5,8%. O número cromossômico modal é 59. Quatorze cromossomos marcadores (constitutivos) eram comuns à maioria das metafases S. Não foi detectado nenhum cromossomo Y na preparação corada com QM.

04Identifiers

Citation
Calu-6 (número de catálogo da Cytion 300135)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 negativo
Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produto da frequência fenotípica: 0,0031
Mutational profile
As células CaLu-6 apresentam uma mutação no códon 61 do gene KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Não foram detectadas mutações nos genes NRAS ou BRAF.

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS e 1% de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
2 x 10⁴ células/cm² resultarão em uma monocamada com 90% de confluência em cerca de 4 dias
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se fixem por pelo menos 48 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
61 anos
Ethnicity
caucasiano