Gå til innholdet
Calu-6-celler
Vev
Lunge
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumenter

Calu-6-celler

Cell line · Produktnummer 300135

Calu-6-cellelinjen er en human cellelinje fra ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) som stammer fra pleuralvæske hos en 61 år gammel mannlig pasient. Etablering...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Calu-6-cellelinjen er en human ikke-småcellet lungekarsinomcellelinje (NSCLC) som stammer fra pleuraeffusjon fra en 61 år gammel mannlig pasient. Denne cellelinjen ble etablert i 1975 og har vært en viktig modell i forskningen på lungekreft. Calu-6-celler har en utpreget epitelmorfologi og har blitt brukt i utstrakt grad til å studere lungekreftbiologien, inkludert mekanismer for metastasering, medikamentresistens og tumorens mikromiljø. Disse cellene er spesielt kjent for sin evne til å danne svulster i xenotransplantasjonsmodeller, noe som gjør dem svært verdifulle for in vivo-studier av tumorvekst og respons på behandling.

Calu-6 er kjennetegnet av et høyt nivå av KRAS-mutasjon, som er vanlig i NSCLC, og er en relevant modell for å studere dette onkogenets rolle i lungekreft. Cellelinjen viser også flere cytogenetiske avvik som er typiske for kreftceller, som komplekse karyotyper og aneuploidi, noe som bidrar til at den kan brukes i genetiske studier. Forskning på Calu-6-cellelinjen har bidratt til å forstå de cellulære mekanismene bak lungekreft og til utvikling av behandlingsstrategier. Den robuste veksten i kultur og evnen til å etterligne kliniske aspekter ved lungekreft gjør den til en uunnværlig ressurs i onkologisk forskning.

Vev
Lunge
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus. Danner dårlig differensiert karsinom
Karyotype
Stamlinjekromosomtallet er hypotriploid, og 2S-komponenten forekom med 5,8 %. Modalt kromosomtall er 59. Fjorten markørkromosomer (konstitutive) var felles for de fleste S-metafasene. Det ble ikke påvist noe Y-kromosom i det QM-fargede preparatet.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Calu-6 (Cytion katalognummer 300135)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53 negativ
Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0031
Mutasjonsprofil
CaLu-6-celler har en mutasjon i KRAS kodon 61, c.181C>A p.(Gln61Lys). NRAS- eller BRAF-mutasjon ble ikke påvist.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2 vil resultere i et 90 % konfluent monolag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
61 år
Etnisitet
Kaukasisk