Preskoči na vsebino
Celice Calu-6
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Adenokarcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumenti

Celice Calu-6

Cell line · Številka izdelka 300135

Celična linija Calu-6 je človeška celična linija nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma (NSCLC), pridobljena iz plevralnega izliva 61-letnega moškega bolnika. Ustanovljena...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Calu-6 je celična linija človeškega nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma (NSCLC), pridobljena iz plevralnega izliva 61-letnega bolnika. Ta celična linija, ki je bila ustanovljena leta 1975, je bila ključni model pri raziskavah pljučnega raka. Calu-6 celice imajo izrazito epitelijsko morfologijo in so se pogosto uporabljale za preučevanje biologije pljučnega raka, vključno z mehanizmi metastaziranja, odpornostjo na zdravila in tumorskim mikrookoljem. Te celice so še posebej znane po tem, da so sposobne tvoriti tumorje v ksenografskih modelih, zaradi česar so zelo dragocene za študije in vivo rasti tumorjev in odziva na terapijo.

Za Calu-6 je značilna visoka stopnja mutacije KRAS, ki je pogosta pri NSCLC, in predstavlja ustrezen model za preučevanje vloge tega onkogena pri pljučnem raku. Celična linija ima tudi več citogenetskih anomalij, značilnih za rakave celice, kot so kompleksni kariotip in anevploidija, kar prispeva k njeni uporabi v genetskih študijah. Raziskave z uporabo celične linije Calu-6 so pripomogle k razumevanju celičnih mehanizmov pljučnega raka in razvoju terapevtskih strategij. Zaradi njene močne rasti v kulturi in sposobnosti posnemanja kliničnih vidikov pljučnega raka je nepogrešljiv vir v onkoloških raziskavah.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Adenokarcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših. Oblikuje slabo diferenciran karcinom
Kariotip
Število matičnih kromosomov je hipotriploidno, komponenta 2S pa je 5,8-odstotna. Modalno število kromosomov je 59. Štirinajst označevalnih kromosomov (konstitutivnih) je bilo skupnih večini metafaz S. V preparatu, obarvanem s QM, ni bil zaznan kromosom Y.

04Identifikatorji

Navajanje vira
Calu-6 (kataloška številka Cytion 300135)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 negativen
Izoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0031
Profil mutacij
Celice CaLu-6 imajo mutacijo v kodonu 61 KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Mutacije NRAS ali BRAF niso odkrili.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh povzročilo 90 % konfluentno monoslojno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
61 let
Etnična pripadnost
Kavkaški