
- Tissue
- 肺部
- Disease
- 腺癌
- Metastatic site
- 胸腔积液
- Synonyms
- CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06
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Calu-6 细胞
Cell line · Product number 300135
The Calu-6 cell line is a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cell line derived from the pleural effusion of a 61-year-old male patient. Establish...
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01General information
- Description
Calu-6 细胞系是一种人类非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系,来源于一名 61 岁男性患者的胸腔积液。该细胞系建立于 1975 年,一直是肺癌研究的重要模型。Calu-6 细胞具有独特的上皮形态,被广泛用于研究肺癌的生物学特性,包括转移机制、耐药性和肿瘤微环境。这些细胞在异种移植模型中形成肿瘤的能力尤为突出,这使它们在体内研究肿瘤生长和对治疗药物的反应方面极具价值。
Calu-6的特点是KRAS突变水平高,这在NSCLC中很常见,为研究这种癌基因在肺癌中的作用提供了一个相关模型。该细胞系还显示出癌细胞典型的几种细胞遗传异常,如复杂的核型和非整倍体,这有助于其在遗传学研究中的应用。利用 Calu-6 细胞系进行的研究有助于了解肺癌的细胞机制和开发治疗策略。它在培养过程中生长旺盛,能够模拟肺癌的临床表现,是肿瘤研究中不可或缺的资源。
- Tissue
- 肺部
- Disease
- 腺癌
- Metastatic site
- 胸腔积液
- Synonyms
- CaLu-6
- CALU-6
- Calu.6
- Calu 6
- Calu6
- CALU6
- CaLu-06
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 是,在裸鼠体内。形成分化不良癌
- Karyotype
- 干系染色体数为低倍体,2S 成分占 5.8%。模态染色体数为 59。大多数 S 裂片中都有 14 条标记染色体(组成型)。在 QM 染色制备物中未检测到 Y 染色体。
04Identifiers
- Citation
- Calu-6(Cytion 目录号 300135)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0236
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 阴性
- Isoenzymes
- Me-2,1,PGM3,1,PGM1,2,ES-D,1,AK-1,1,GLO-1,2,G6PD,B,表型频率产品: 0.0031
- Mutational profile
- CaLu-6 细胞携带 KRAS 第 61 密码子 c.181C>A p.(Gln61Lys) 突变。未检测到 BRAF 的 NRAS 突变。
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 2×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成90%融合的单层细胞。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,让细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁48小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 61 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes