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Células Calu-6
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Documentos

Células Calu-6

Cell line · Número de producto 300135

La línea celular Calu-6 es una línea celular de carcinoma pulmonar humano de células no pequeñas (NSCLC) derivada del derrame pleural de un paciente varón de 61 años. Establecer...

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01Información general

Descripción

La línea celular Calu-6 es una línea celular humana de carcinoma pulmonar no microcítico (CPNM) derivada del derrame pleural de un paciente varón de 61 años. Creada en 1975, esta línea celular ha sido un modelo fundamental en la investigación del cáncer de pulmón. Las células Calu-6 presentan una morfología epitelial distintiva y se han utilizado ampliamente para estudiar la biología del cáncer de pulmón, incluidos los mecanismos de metástasis, la resistencia a los fármacos y el microambiente tumoral. Estas células destacan especialmente por su capacidad para formar tumores en modelos de xenoinjerto, lo que las hace muy valiosas para los estudios in vivo del crecimiento tumoral y la respuesta a los tratamientos.

Calu-6 se caracteriza por un alto nivel de mutación KRAS, común en el CPNM, y proporciona un modelo relevante para estudiar el papel de este oncogén en el cáncer de pulmón. La línea celular también presenta varias anomalías citogenéticas típicas de las células cancerosas, como cariotipos complejos y aneuploidía, que contribuyen a su uso en estudios genéticos. La investigación con la línea celular Calu-6 ha ayudado a comprender los mecanismos celulares del cáncer de pulmón y a desarrollar estrategias terapéuticas. Su robusto crecimiento en cultivo y la capacidad de imitar aspectos clínicos del cáncer de pulmón la convierten en un recurso indispensable en la investigación oncológica.

Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Adenocarcinoma
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos. Forma carcinoma poco diferenciado
Cariotipo
El número cromosómico stemline es hipotriploide y el componente 2S se presenta en un 5,8%. El número cromosómico modal es 59. Catorce cromosomas marcadores (constitutivos) eran comunes a la mayoría de las metafases S. No se detectó ningún cromosoma Y en la preparación teñida con QM.

04Identificadores

Referencia
Calu-6 (número de catálogo 300135 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
P53 negativo
Isoenzimas
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Producto de Frecuencia de Fenotipo: 0.0031
Perfil mutacional
Las células CaLu-6 presentan una mutación en el codón 61 de KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). No se detectó la mutación NRAS de BRAF.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
2 x 104 células/cm2 darán como resultado una monocapa confluente al 90 % en aproximadamente 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 48 horas.
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
61 años
Origen étnico
Caucásico