Премини към съдържанието
Клетки Calu-6
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Документи

Клетки Calu-6

Cell line · Номер на продукта 300135

Клетъчната линия Calu-6 е клетъчна линия от човешки недребноклетъчен белодробен карцином (NSCLC), получена от плеврален излив на 61-годишен мъж. Установяване...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия Calu-6 е човешка клетъчна линия на недребноклетъчен белодробен карцином (НДКБК), получена от плеврален излив на 61-годишен пациент. Създадена през 1975 г., тази клетъчна линия е важен модел в изследванията на белодробния рак. Клетките Calu-6 имат ясно изразена епителна морфология и са използвани широко за изучаване на биологията на рака на белия дроб, включително механизмите на метастазиране, лекарствената резистентност и туморната микросреда. Тези клетки се отличават с особена способност да образуват тумори в ксенографски модели, което ги прави изключително ценни за in vivo проучвания на туморния растеж и отговора към терапевтични средства.

Calu-6 се характеризира с високо ниво на мутация на KRAS, често срещана при NSCLC, и представлява подходящ модел за изучаване на ролята на този онкоген при рака на белия дроб. Клетъчната линия показва и няколко цитогенетични аномалии, типични за раковите клетки, като сложни кариотипове и анеуплоидии, които допринасят за използването ѝ в генетични изследвания. Изследванията, в които се използва клетъчната линия Calu-6, спомагат за разбирането на клетъчните механизми на рака на белия дроб и за разработването на терапевтични стратегии. Нейният стабилен растеж в култура и способността ѝ да имитира клиничните аспекти на рака на белия дроб я правят незаменим ресурс в онкологичните изследвания.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки. Образува слабо диференциран карцином
Кариотип
Стволовият хромозомен брой е хипотриплоиден, а компонентът 2S е 5,8%. Модалният хромозомен брой е 59. Четиринадесет маркерни хромозоми (конститутивни) са общи за повечето S метафази. В оцветения с QM препарат не е открита Y хромозома.

04Идентификатори

Източник
Calu-6 (каталожен номер 300135 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0236

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
P53 отрицателен
Изоензими
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Фенотип Честота на продукта: 0.0031
Мутационен профил
Клетките CaLu-6 носят мутация в кодон 61 на KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Не е открита мутация на NRAS или BRAF.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/cm2 ще доведат до 90% конфлуентен монослой за около 4 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, разположете клетките на 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за поне 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
61 години
Етническа принадлежност
Кавказки