Mine otse sisu juurde
Calu-6 rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumendid

Calu-6 rakud

Cell line · Toote number 300135

Calu-6 rakuliin on inimese mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) rakuliin, mis on saadud 61-aastase meespatsiendi pleuraefusioonist. Luuakse...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Calu-6 rakuliin on inimese mitteväikerakk-kopsukartsinoomi (NSCLC) rakuliin, mis on saadud 61-aastase meessoost patsiendi pleuraefusioonist. See 1975. aastal loodud rakuliin on olnud kriitiline mudel kopsuvähi uurimisel. Calu-6 rakkudel on selge epiteeli morfoloogia ja neid on laialdaselt kasutatud kopsuvähi bioloogia, sealhulgas metastaaside tekkimise, ravimiresistentsuse ja kasvaja mikrokeskkonna uurimiseks. Need rakud on eriti tuntud oma võime poolest moodustada ksenotransplantaadi mudelites kasvajaid, mis muudab need väga väärtuslikuks in vivo uuringutes, kus uuritakse kasvaja kasvu ja ravivastust.

Calu-6-le on iseloomulik KRAS-mutatsiooni kõrge tase, mis on levinud NSCLC puhul, ning see on asjakohane mudel selle onkogeeni rolli uurimiseks kopsuvähis. Rakuliinil on ka mitmeid vähirakkudele iseloomulikke tsütogeneetilisi anomaaliaid, nagu keerukas karüotüüp ja aneuploidsus, mis aitavad kaasa selle kasutamisele geneetilistes uuringutes. Calu-6 rakuliini kasutavad uuringud on aidanud mõista kopsuvähi rakumehhanisme ja töötada välja ravistrateegiaid. Selle tugev kasv kultuuris ja võime jäljendada kopsuvähi kliinilisi aspekte muudavad selle asendamatuks ressursiks onkoloogilistes uuringutes.

Kude
Kopsud
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustab halvasti diferentseerunud kartsinoomi
Karyotüüp
Tüveline kromosoomide arv on hüpotriploidne ja 2S-komponent esines 5,8% ulatuses. Modaalne kromosoomide arv on 59. Enamikul S-metafaasidel oli 14 markerkromosoomi (konstitutiivne). QM-värvitud preparaadis ei tuvastatud Y-kromosoomi.

04Tunnused

Viide
Calu-6 (Cytioni katalooginumber 300135)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 negatiivne
Isoensüümid
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0031
Mutatsiooniprofiil
CaLu-6 rakud kannavad KRAS-i koodon 61 mutatsiooni, c.181C>A p.(Gln61Lys). BRAF-i NRAS-i mutatsiooni ei tuvastatud.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2 annab umbes 4 päeva jooksul 90% konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
61 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia