Ga naar de inhoud
Calu-6 Cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Documenten

Calu-6 Cellen

Cell line · Productnummer 300135

De Calu-6-cellijn is een menselijke cellijn van niet-kleincellig longcarcinoom (NSCLC) die is afgeleid van de pleurale effusie van een 61-jarige mannelijke patiënt. Vastgesteld...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Calu-6 cellijn is een menselijke niet-kleincellige longcarcinoom (NSCLC) cellijn afkomstig van de pleurale effusie van een 61-jarige mannelijke patiënt. Deze cellijn werd in 1975 ontwikkeld en is een cruciaal model voor longkankeronderzoek. Calu-6 cellen vertonen een duidelijke epitheliale morfologie en zijn uitgebreid gebruikt om de biologie van longkanker te bestuderen, waaronder mechanismen van metastase, resistentie tegen medicijnen en de tumormicro-omgeving. Deze cellen staan vooral bekend om hun vermogen om tumoren te vormen in xenograft modellen, waardoor ze zeer waardevol zijn voor in vivo studies naar tumorgroei en de respons op therapeutica.

Calu-6 wordt gekenmerkt door een hoge mate van KRAS-mutatie, die veel voorkomt in NSCLC, en biedt een relevant model voor het bestuderen van de rol van dit oncogen in longkanker. De cellijn vertoont ook verschillende cytogenetische afwijkingen die typisch zijn voor kankercellen, zoals complexe karyotypes en aneuploïdie, wat bijdraagt aan het gebruik ervan in genetische studies. Onderzoek met de Calu-6 cellijn heeft geholpen bij het begrijpen van de cellulaire mechanismen van longkanker en bij de ontwikkeling van therapeutische strategieën. De robuuste groei in kweek en de mogelijkheid om klinische aspecten van longkanker na te bootsen, maken het een onmisbare bron voor oncologisch onderzoek.

Weefsel
Long
Ziekte
Adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen. Vormt slecht gedifferentieerd carcinoom
Karyotype
Het stamlijnchromosoomnummer is hypotriploïd en de 2S-component kwam voor bij 5,8%. Het modale chromosoomnummer is 59. Veertien markerchromosomen (constitutief) kwamen in de meeste S-metafasen voor. Er werd geen Y-chromosoom gedetecteerd in het QM-gekleurde preparaat.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Calu-6 (Cytion catalogusnummer 300135)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53 negatief
Iso-enzymen
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotype Frequentie Product: 0.0031
Mutatieprofiel
CaLu-6 cellen dragen een mutatie in codon 61 van KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). NRAS- of BRAF-mutatie werd niet gedetecteerd.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 x 104 cellen/cm2 resulteert in een 90% confluente monolaag in ongeveer 4 dagen.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 48 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
61 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch