Prejsť na obsah
Bunky Calu-6
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumenty

Bunky Calu-6

Cell line · Číslo výrobku 300135

Bunková línia Calu-6 je ľudská bunková línia nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC), získaná z pleurálneho výpotku 61-ročného mužského pacienta. Stanovenie...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia Calu-6 je ľudská bunková línia nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC) odvodená z pleurálneho výpotku 61-ročného muža. Táto bunková línia bola vytvorená v roku 1975 a je rozhodujúcim modelom vo výskume rakoviny pľúc. Bunky Calu-6 vykazujú výraznú epitelovú morfológiu a vo veľkej miere sa používajú na štúdium biológie rakoviny pľúc vrátane mechanizmov metastázovania, rezistencie na lieky a mikroprostredia nádoru. Tieto bunky sú obzvlášť známe svojou schopnosťou vytvárať nádory v xenotransplantačných modeloch, vďaka čomu sú veľmi cenné pre štúdie in vivo rastu nádorov a reakcie na terapiu.

Calu-6 sa vyznačuje vysokou úrovňou mutácie KRAS, ktorá je bežná pri NSCLC, a predstavuje vhodný model na štúdium úlohy tohto onkogénu pri rakovine pľúc. Bunková línia vykazuje aj niekoľko cytogenetických anomálií typických pre rakovinové bunky, ako sú komplexné karyotypy a aneuploidie, ktoré prispievajú k jej využitiu v genetických štúdiách. Výskum využívajúci bunkovú líniu Calu-6 pomohol pri pochopení bunkových mechanizmov rakoviny pľúc a pri vývoji terapeutických stratégií. Jej silný rast v kultúre a schopnosť napodobňovať klinické aspekty rakoviny pľúc z nej robia nenahraditeľný zdroj v onkologickom výskume.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach. Vytvára slabo diferencovaný karcinóm
Karyotyp
Počet kmeňových chromozómov je hypotriploidný a zložka 2S sa vyskytovala na úrovni 5,8 %. Modálny počet chromozómov je 59. Štrnásť markerových chromozómov (konštitutívnych) bolo spoločných pre väčšinu metafáz S. V preparáte farbenom QM sa nezistil žiadny chromozóm Y.

04Identifikátory

Citácia
Calu-6 (katalógové číslo Cytion 300135)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
P53 negatívny
Izoenzýmy
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produkt frekvencie fenotypu: 0.0031
Mutčný profil
Bunky CaLu-6 nesú mutáciu v kodóne 61 KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). Mutácia NRAS BRAF nebola zistená.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buniek/cm2 bude mať za následok 90 % konfluentnú monovrstvu za približne 4 dni.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v množstve 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilepiť sa najmenej 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
61 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský