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Cellule Calu-6
Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Documenti

Cellule Calu-6

Cell line · Codice prodotto 300135

La linea cellulare Calu-6 è una linea cellulare di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) umano derivata dal versamento pleurico di un paziente di sesso maschile di 61 anni. Stabilire...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Calu-6 è una linea cellulare di carcinoma polmonare umano non a piccole cellule (NSCLC) derivata dal versamento pleurico di un paziente maschio di 61 anni. Fondata nel 1975, questa linea cellulare è stata un modello fondamentale nella ricerca sul cancro del polmone. Le cellule Calu-6 presentano una morfologia epiteliale distinta e sono state ampiamente utilizzate per studiare la biologia del cancro al polmone, compresi i meccanismi di metastasi, la resistenza ai farmaci e il microambiente tumorale. Queste cellule sono particolarmente note per la loro capacità di formare tumori in modelli di xenotrapianto, il che le rende molto preziose per gli studi in vivo della crescita tumorale e della risposta ai farmaci.

Calu-6 è caratterizzata da un alto livello di mutazione KRAS, comune nel NSCLC, e fornisce un modello rilevante per lo studio del ruolo di questo oncogene nel cancro del polmone. La linea cellulare presenta anche diverse anomalie citogenetiche tipiche delle cellule tumorali, come cariotipi complessi e aneuploidia, che contribuiscono al suo utilizzo negli studi genetici. La ricerca che utilizza la linea cellulare Calu-6 ha contribuito alla comprensione dei meccanismi cellulari del cancro al polmone e allo sviluppo di strategie terapeutiche. La sua robusta crescita in coltura e la capacità di mimare gli aspetti clinici del cancro al polmone la rendono una risorsa indispensabile nella ricerca oncologica.

Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi. Forma un carcinoma scarsamente differenziato
Cariotipo
Il numero di cromosomi della linea staminale è ipotriploide e la componente 2S si è verificata al 5,8%. Il numero modale di cromosomi è 59. Quattordici cromosomi marcatori (costitutivi) erano comuni alla maggior parte delle metafasi S. Non è stato rilevato alcun cromosoma Y nel preparato colorato con QM.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Calu-6 (numero di catalogo Cytion 300135)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53 negativo
Isoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0031
Profilo mutazionale
Le cellule CaLu-6 presentano una mutazione nel codone 61 di KRAS, c.181C>A p.(Gln61Lys). La mutazione NRAS o BRAF non è stata rilevata.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2 daranno luogo a un monostrato confluente al 90% in circa 4 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
61 anni
Etnia
Caucasico