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Calu-6細胞
ティッシュ
肺
病気
腺癌
転移部位
胸水
同義語
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Calu-6細胞

Cell line · 製品番号 300135

Calu-6細胞株は、61歳の男性患者の胸水から樹立されたヒト非小細胞肺がん(NSCLC)細胞株である。樹立...

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01概要

説明

Calu-6細胞株は、61歳の男性患者の胸水から得られたヒト非小細胞肺癌(NSCLC)細胞株である。1975年に樹立されたこの細胞株は、肺癌研究において重要なモデルとなっている。Calu-6細胞は明瞭な上皮形態を示し、転移のメカニズム、薬剤耐性、腫瘍微小環境など肺癌の生物学的研究に広く用いられてきた。これらの細胞は、異種移植モデルにおいて腫瘍を形成する能力で特に注目されており、腫瘍の増殖や治療薬に対する反応をin vivoで研究する上で非常に有用である。

Calu-6は、NSCLCで一般的なKRAS変異が多いという特徴があり、肺癌におけるこの癌遺伝子の役割を研究するのに適したモデルである。この細胞株はまた、複雑な核型や異数性など、がん細胞に典型的ないくつかの細胞遺伝学的異常を示し、遺伝学的研究での利用に貢献している。Calu-6細胞株を用いた研究は、肺癌の細胞メカニズムの理解と治療戦略の開発に役立っている。培養におけるその強固な増殖と肺癌の臨床的側面を模倣する能力により、腫瘍学研究において欠くことのできないリソースとなっている。

ティッシュ
肺
病気
腺癌
転移部位
胸水
同義語
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。低分化癌を形成
核型
幹線の染色体数は4倍体で、2S成分は5.8%であった。標準染色体数は59。14本のマーカー染色体(構成性)がほとんどのSメタフェースに共通。QM染色標本ではY染色体は検出されなかった。

04識別子

引用
Calu-6 (Cytion カタログ番号 300135)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0236

05発現と感受性

タンパク質の発現
P53陰性
アイソザイム
Me-2、1、PGM3、1、PGM1、2、ES-D、1、AK-1、1、GLO-1、2、G6PD、B、表現型頻度積: 0.0031
変異プロファイル
CaLu-6細胞はKRASコドン61、c.181C>A p.(Gln61Lys)に変異を有する。BRAFのNRAS変異は検出されなかった。

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
2 × 10⁴ 細胞/cm² を播種すると、約4日で90%コンフルエントな単層が形成される
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも48時間行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
61年
民族
白人