Siirry sisältöön
Calu-6-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Adenokarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Asiakirjat

Calu-6-solut

Cell line · Tuotenumero 300135

Calu-6-solulinja on ihmisen ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) -solulinja, joka on peräisin 61-vuotiaan miespotilaan keuhkopussinesteestä. Perustettu...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Calu-6-solulinja on ihmisen ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC) solulinja, joka on peräisin 61-vuotiaan miespotilaan pleuraeritteestä. Tämä vuonna 1975 perustettu solulinja on ollut tärkeä malli keuhkosyöpätutkimuksessa. Calu-6-soluilla on selkeä epiteelimorfologia, ja niitä on käytetty laajasti keuhkosyövän biologian tutkimiseen, mukaan lukien etäpesäkkeiden, lääkeresistenssin ja kasvaimen mikroympäristön mekanismit. Nämä solut tunnetaan erityisesti kyvystään muodostaa kasvaimia ksenograft-malleissa, mikä tekee niistä erittäin arvokkaita in vivo -tutkimuksissa, joissa tutkitaan kasvaimen kasvua ja vastetta terapeuttisille aineille.

Calu-6:lle on ominaista korkea KRAS-mutaatioaste, joka on yleinen NSCLC:ssä, ja se tarjoaa asianmukaisen mallin tämän onkogeenin roolin tutkimiseen keuhkosyövässä. Solulinjalla on myös useita syöpäsoluille tyypillisiä sytogeneettisiä poikkeavuuksia, kuten monimutkainen karyotyyppi ja aneuploidia, jotka edistävät sen käyttöä geneettisissä tutkimuksissa. Calu-6-solulinjaa hyödyntävä tutkimus on auttanut ymmärtämään keuhkosyövän solumekanismeja ja kehittämään hoitostrategioita. Sen vankka kasvu viljelyssä ja kyky jäljitellä keuhkosyövän kliinisiä näkökohtia tekevät siitä korvaamattoman resurssin onkologisessa tutkimuksessa.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Adenokarsinooma
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä. Muodostaa huonosti erilaistunutta karsinoomaa
Karyotyyppi
Kromosomien kantalinjaluku on hypotriploidi, ja 2S-komponenttia esiintyi 5,8 prosenttia. Modaalinen kromosomiluku on 59. Neljätoista merkkikromosomia (konstitutiivinen) oli yhteistä useimmille S-metafaaseille. Y-kromosomia ei havaittu QM-värjätyssä valmisteessa.

04Tunnisteet

Lähdeviite
Calu-6 (Cytionin luettelonumero 300135)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53 negatiivinen
Isoentsyymit
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0031
Mutaatioprofiili
CaLu-6-soluissa on mutaatio KRAS-kodonissa 61, c.181C>A p.(Gln61Lys). NRAS- tai BRAF-mutaatiota ei havaittu.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2 x 104 solua/cm2 tuottaa 90 %:n konfluenttisen monokerroksen noin 4 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
61 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen