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Calu-6-Zellen
Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

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Calu-6-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300135

Die Zelllinie Calu-6 ist eine menschliche Zelllinie des nicht-kleinzelligen Lungenkarzinoms (NSCLC), die aus dem Pleuraerguss eines 61-jährigen männlichen Patienten gewonnen wurde. Etablierung...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Calu-6-Zelllinie ist eine humane Zelllinie des nicht-kleinzelligen Lungenkarzinoms (NSCLC), die aus dem Pleuraerguss eines 61-jährigen männlichen Patienten stammt. Diese Zelllinie wurde 1975 eingeführt und ist ein wichtiges Modell für die Lungenkrebsforschung. Calu-6-Zellen weisen eine ausgeprägte epitheliale Morphologie auf und wurden ausgiebig zur Untersuchung der Biologie des Lungenkrebses verwendet, einschließlich der Mechanismen der Metastasierung, der Arzneimittelresistenz und der Mikroumgebung des Tumors. Diese Zellen zeichnen sich besonders durch ihre Fähigkeit aus, in Xenotransplantationsmodellen Tumore zu bilden, was sie für In-vivo-Untersuchungen des Tumorwachstums und des Ansprechens auf Therapeutika sehr wertvoll macht.

Calu-6 zeichnet sich durch einen hohen Grad an KRAS-Mutation aus, die bei nicht-kleinzelligem Lungenkrebs häufig vorkommt, und stellt ein relevantes Modell für die Untersuchung der Rolle dieses Onkogens bei Lungenkrebs dar. Die Zelllinie weist auch mehrere zytogenetische Anomalien auf, die für Krebszellen typisch sind, wie z. B. einen komplexen Karyotyp und Aneuploidie, was ihre Verwendung in genetischen Studien begünstigt. Die Forschung mit der Calu-6-Zelllinie hat zum Verständnis der zellulären Mechanismen von Lungenkrebs und zur Entwicklung von therapeutischen Strategien beigetragen. Ihr robustes Wachstum in der Kultur und die Fähigkeit, klinische Aspekte des Lungenkrebses zu imitieren, machen sie zu einer unverzichtbaren Ressource in der onkologischen Forschung.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen. Bildet schlecht differenzierte Karzinome
Karyotyp
Die Stammchromosomenzahl ist hypotriploid und die 2S-Komponente liegt bei 5,8 %. Die modale Chromosomenzahl beträgt 59. Vierzehn Markerchromosomen (konstitutiv) waren den meisten S-Metaphasen gemeinsam. In dem QM-gefärbten Präparat wurde kein Y-Chromosom nachgewiesen.

04Bezeichner

Quellenangabe
Calu-6 (Cytion Katalognummer 300135)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 negativ
Isoenzyme
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0031
Mutationsprofil
CaLu-6-Zellen tragen eine Mutation in KRAS Codon 61, c.181C>A p.(Gln61Lys). Eine NRAS- oder BRAF-Mutation wurde nicht nachgewiesen.

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 4 Tagen eine zu 90 % konfluente Monoschicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
61 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch