Gå direkte til indholdet
Calu-6-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumenter

Calu-6-celler

Cell line · Varenummer 300135

Calu-6-cellelinjen er en human cellelinje fra ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), der stammer fra pleuralvæske fra en 61-årig mandlig patient. Etablering...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Calu-6-cellelinjen er en human ikke-småcellet lungekarcinom (NSCLC) cellelinje, der stammer fra pleuraeffusionen fra en 61-årig mandlig patient. Denne cellelinje blev etableret i 1975 og har været en vigtig model i forskningen i lungekræft. Calu-6-celler udviser en tydelig epitelmorfologi og er blevet brugt i stor udstrækning til at studere lungecancers biologi, herunder mekanismer for metastase, lægemiddelresistens og tumorens mikromiljø. Disse celler er især kendt for deres evne til at danne tumorer i xenotransplantationsmodeller, hvilket gør dem meget værdifulde til in vivo-undersøgelser af tumorvækst og respons på terapi.

Calu-6 er kendetegnet ved en høj grad af KRAS-mutation, som er almindelig i NSCLC, og er en relevant model til undersøgelse af dette onkogens rolle i lungekræft. Cellelinjen udviser også flere cytogenetiske anomalier, der er typiske for kræftceller, såsom komplekse karyotyper og aneuploidi, hvilket bidrager til dens anvendelse i genetiske undersøgelser. Forskning med Calu-6-cellelinjen har hjulpet med at forstå de cellulære mekanismer i lungekræft og med at udvikle terapeutiske strategier. Dens robuste vækst i kultur og evnen til at efterligne kliniske aspekter af lungekræft gør den til en uundværlig ressource i onkologisk forskning.

Væv
Lunge
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus. Danner dårligt differentieret karcinom
Karyotype
Stammekromosomnummeret er hypotriploid, og 2S-komponenten forekom med 5,8 %. Modalt kromosomtal er 59. Fjorten markørkromosomer (konstitutive) var fælles for de fleste S-metafaser. Der blev ikke fundet noget Y-kromosom i det QM-farvede præparat.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Calu-6 (Cytion katalognummer 300135)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53 negativ
Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0031
Mutationsprofil
CaLu-6-celler bærer en mutation i KRAS codon 61, c.181C>A p.(Gln61Lys). NRAS- eller BRAF-mutation blev ikke påvist.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2 vil resultere i et 90 % konfluent monolag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
61 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk