Pereiti prie turinio
Calu-6 ląstelės
Audinys
Plaučiai
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
CaLu-6, CALU-6, Calu.6, Calu 6, Calu6, CALU6, CaLu-06

Dokumentai

Calu-6 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300135

Calu-6 ląstelių linija yra žmogaus nedidelio ląstelių plaučių karcinomos (NSCLC) ląstelių linija, gauta iš 61 metų amžiaus vyro pleuros išsiliejimo. Nustatyta...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Calu-6 ląstelių linija yra žmogaus nesmulkialąstelinės plaučių karcinomos (NSLPV) ląstelių linija, gauta iš 61 metų vyro pleuros išskyrų. Ši ląstelių linija, sukurta 1975 m., yra labai svarbus modelis plaučių vėžio tyrimams. Calu-6 ląstelės pasižymi ryškia epitelio morfologija ir buvo plačiai naudojamos plaučių vėžio biologijai, įskaitant metastazavimo mechanizmus, atsparumą vaistams ir naviko mikroaplinką, tirti. Šios ląstelės ypač pasižymi gebėjimu formuoti navikus ksenograftų modeliuose, todėl yra labai vertingos in vivo navikų augimo ir atsako į gydymą tyrimams.

Calu-6 būdingos didelės KRAS mutacijos, kurios būdingos NSLPV, todėl tai yra tinkamas modelis šio onkogeno vaidmeniui plaučių vėžyje tirti. Ląstelių linija taip pat pasižymi keliomis vėžio ląstelėms būdingomis citogenetinėmis anomalijomis, pavyzdžiui, sudėtingu kariotipu ir aneuploidija, todėl ją galima naudoti genetiniams tyrimams. Tyrimai, atlikti naudojant Calu-6 ląstelių liniją, padėjo suprasti plaučių vėžio ląstelinius mechanizmus ir kurti gydymo strategijas. Dėl stipraus augimo kultūroje ir gebėjimo imituoti klinikinius plaučių vėžio aspektus ji yra nepakeičiamas šaltinis onkologiniuose tyrimuose.

Audinys
Plaučiai
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
  • CaLu-6
  • CALU-6
  • Calu.6
  • Calu 6
  • Calu6
  • CALU6
  • CaLu-06

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms. Formuojasi prastai diferencijuota karcinoma
Kariotipas
Kamieninių chromosomų skaičius yra hipotriploidinis, o 2S komponentas sudaro 5,8 %. Modalinis chromosomų skaičius yra 59. Daugumai S metafazių buvo būdingos keturiolika žyminių chromosomų (konstitutyvių). QM dažytame preparate neaptikta Y chromosomos.

04Identifikatoriai

Nuoroda
Calu-6 (Cytion katalogo numeris 300135)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0236

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 neigiamas
Izofermentai
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipo dažnio produktas: 0.0031
Mutacijų profilis
CaLu-6 ląstelėse yra KRAS 61 kodono mutacija, c.181C>A p.(Gln61Lys). NRAS ar BRAF mutacijos neaptikta.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys 90 % konfluentinį monosluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
61 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių