Cellules NCH421K

La lignée cellulaire NCH421K est une lignée de cellules de type souche de glioblastome humain dérivée d’une tumeur primaire de glioblastome prélevée chez un patient adulte. Cette lignée cellulaire appartient à une classe de cellules initiatrices de tumeurs qui conservent les caractéristiques clés des cellules souches neurales, notamment la capacité d’auto-renouvellement, la multipotence et la capacité de reproduire l’hétérogénéité tumorale. Les cellules NCH421K sont généralement cultivées dans des conditions sans sérum et se développent sous forme de neurosphères non adhérentes, une caractéristique distinctive des cultures de gliomes de type souche. Elles expriment des marqueurs canoniques des cellules souches, tels que le CD133 et la nestine, ce qui confirme leur classification en tant que modèle de glioblastome de type souche.

La croissance et la survie des cellules NCH421K dépendent fortement du facteur de croissance basique des fibroblastes (bFGF), qui favorise la prolifération et le maintien des caractéristiques de type souche, tandis que le facteur de croissance épidermique (EGF) n’a qu’un effet minime sur leur expansion. Les cellules conservent une expression élevée des marqueurs des cellules souches sous stimulation par le bFGF et démontrent la capacité de former des tumeurs in vivo, ce qui met en évidence leur potentiel tumorigène. En raison de ces propriétés, la lignée NCH421K est largement utilisée dans les études portant sur la biologie des cellules souches du glioblastome, la résistance aux traitements, les stratégies de différenciation et l’évaluation de traitements ciblés visant à éradiquer les populations de cellules initiatrices de tumeurs.

Cette lignée cellulaire a été établie par Christel Herold-Mende à partir de tissu de glioblastome.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.