Cellule NCH421K

NCH421K è una linea cellulare umana simile alle cellule staminali del glioblastoma, derivata da un tumore primario di glioblastoma prelevato da un paziente adulto. Questa linea cellulare appartiene a una classe di cellule tumorali iniciatrici che conservano caratteristiche fondamentali delle cellule staminali neurali, tra cui la capacità di auto-rinnovamento, la multipotenza e la capacità di riprodurre l'eterogeneità tumorale. Le cellule NCH421K vengono tipicamente coltivate in condizioni prive di siero e crescono come neurosfere non aderenti, una caratteristica distintiva delle colture di glioma simili alle cellule staminali. Esse esprimono marcatori canonici delle cellule staminali come CD133 e nestina, a sostegno della loro classificazione come modello simile alle cellule staminali del glioblastoma.

NCH421K mostra una crescita e una sopravvivenza fortemente dipendenti dal fattore di crescita fibroblastico basico (bFGF), che promuove la proliferazione e il mantenimento delle caratteristiche simili a quelle delle cellule staminali, mentre il fattore di crescita epidermico (EGF) ha un effetto minimo sulla sua espansione. Le cellule mantengono un'elevata espressione dei marcatori delle cellule staminali sotto stimolazione con bFGF e dimostrano la capacità di formare tumori in vivo, evidenziando il loro potenziale tumorigenico. Grazie a queste proprietà, NCH421K è ampiamente utilizzata negli studi sulla biologia delle cellule staminali del glioblastoma, sulla resistenza terapeutica, sulle strategie di differenziazione e sulla valutazione di trattamenti mirati volti a eradicare le popolazioni di cellule tumorali iniziali.

Questa linea cellulare è stata creata da Christel Herold-Mende a partire da tessuto di glioblastoma.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia