Pereiti prie turinio
NCH421K ląstelės
Audinys
Smegenys
Liga
Glioblastoma
Sinonimai
NCH421k

Dokumentai

NCH421K ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300118

NCH421K yra žmogaus glioblastomos kamieninėms ląstelėms panaši ląstelių linija, gauta iš pirminio glioblastomos naviko, paimto iš suaugusio paciento. Ši ląstelių linija priklauso...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Mažos atsargos
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NCH421K yra žmogaus glioblastomos kamieninėms ląstelėms panaši ląstelių linija, gauta iš pirminio glioblastomos naviko, paimto iš suaugusio paciento. Ši ląstelių linija priklauso naviką inicijuojančių ląstelių klasei, kurios išlaiko pagrindines nervinių kamieninių ląstelių savybes, įskaitant savęs atsinaujinimo gebėjimą, daugiapotentiškumą ir gebėjimą atkurti naviko heterogeniškumą. NCH421K ląstelės paprastai auginamos be serumo ir auga kaip neprisitvirtinusios neurosferos, o tai yra kamieninėms gliomos kultūroms būdingas požymis. Jos išreiškia kanoninius kamieninių ląstelių žymeklius, tokius kaip CD133 ir nestinas, o tai patvirtina jų klasifikaciją kaip glioblastomos kamieninių ląstelių modelio.

NCH421K augimas ir išlikimas labai priklauso nuo bazinio fibroblastų augimo faktoriaus (bFGF), kuris skatina proliferaciją ir kamieninėms ląstelėms būdingų savybių išlaikymą, tuo tarpu epiderminis augimo faktorius (EGF) turi minimalų poveikį jų plitimui. Ląstelės išlaiko aukštą kamieninių ląstelių žymenų ekspresiją esant bFGF stimuliacijai ir demonstruoja gebėjimą formuoti navikus in vivo, pabrėždamos savo tumorigeninį potencialą. Dėl šių savybių NCH421K yra plačiai naudojama glioblastomos kamieninių ląstelių biologijos, terapinio atsparumo, diferenciacijos strategijų tyrimuose bei tikslinio gydymo, skirto naviką inicijuojančių ląstelių populiacijų išnaikinimui, vertinime.

Šią ląstelių liniją iš glioblastomos audinio sukūrė Christel Herold-Mende.

Audinys
Smegenys
Liga
Glioblastoma
Sinonimai
  • NCH421k

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Tumorogeninis
Taip
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
35-40 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
NCH421K (Cytion katalogo numeris 300118)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Į terpę įpilkite 5 mg/L heparino, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogramų/L EGF, 5 mg/l insulino, 100 mg/l transferino, 5,2 mikrogramų/l natrio selenito, 6,3 mikrogramų/l progesterono, 161,1 mikrogramų/l putrescino, 50 mg/l hidrokortizono
Subkultūrinis auginimas
Sferoidines kultūras subkultūruoti pradėkite mechaniškai išskirdami sferoidus pipete 5-10 kartų aukštyn ir žemyn, naudodami "Eppendorf" pipetę su 1000 μl filtro antgaliais. Po to 5 minutes kambario temperatūroje centrifuguokite mišinį 300 g sūkių dažniu, kad ląstelės būtų išsklaidytos. Išmeskite supernatantą, o ląstelių granules vėl suberkite į šviežią terpę. Galiausiai resuspenduotas ląsteles perkelkite į naujus kultūros indus, kad būtų skatinamas tolesnis sferoidų formavimasis. Šis metodas užtikrina veiksmingą sferoidų suskaidymą ir paruošia juos tolesniam augimui naujoje aplinkoje
Sėjos tankis
1–2 x 105 ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bent 24-48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame 50 % bazinę terpę + 40 % FBS + 10 % DMSO arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
66 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių