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NCH421K 셀

Cell line · 제품 번호 300118

NCH421K는 성인 환자에게서 채취한 원발성 교모세포종 종양에서 유래한 인간 교모세포종 줄기세포 유사 세포주입니다. 이 세포주는 ...에 속합니다.

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사용자 지정 / 추천 사항

재고 부족
롯
추천 상품 (가장 신선한 상품)
  • CoA
1

01일반 정보

설명

NCH421K는 성인 환자에게서 채취한 원발성 교모세포종 종양에서 유래한 인간 교모세포종 줄기세포 유사 세포주입니다. 이 세포주는 자가 재생 능력, 다능성, 종양 이질성을 재현하는 능력 등 신경 줄기세포의 주요 특징을 유지하는 종양 기시 세포군에 속합니다. NCH421K 세포는 일반적으로 무혈청 배양 조건에서 배양되며, 비부착성 신경구(neurospheres) 형태로 성장하는데, 이는 줄기세포 유사 교모세포종 배양의 특징입니다. 이 세포는 CD133 및 네스틴(nestin)과 같은 전형적인 줄기세포 표지자를 발현하여, 교모세포종 줄기세포 유사 모델로 분류되는 근거를 제공합니다.

NCH421K는 증식과 줄기세포 유사 특성의 유지를 촉진하는 염기성 섬유아세포 성장인자(bFGF)에 크게 의존하여 성장 및 생존하는 반면, 상피성장인자(EGF)는 세포 증식에 거의 영향을 미치지 않습니다. 이 세포들은 bFGF 자극 하에서 줄기세포 표지자의 높은 발현을 유지하며 생체 내에서 종양을 형성하는 능력을 보여줌으로써 종양 형성 잠재력을 입증한다. 이러한 특성 덕분에 NCH421K는 교모세포종 줄기세포 생물학, 치료 저항성, 분화 전략 연구 및 종양 기시 세포 집단을 근절하기 위한 표적 치료법 평가에 널리 사용된다.

이 세포주는 Christel Herold-Mende가 교모세포종 조직을 이용하여 확립했다.

티슈
뇌
질병
교모세포종
동의어
  • NCH421k

02분류

생물체
인간
성
남성
생물안전 등급
1

03특징

종양 유발성
예
배가 시간
35~40시간

04식별자

인용
NCH421K(사이티온 카탈로그 번호 300118)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_x910

05취급 및 배양

배지
DMEM:햄의 F12(1:1), w: 3.1 g/L 포도당, w: 2.5mM L-글루타민, w: 15mM HEPES, w: 0.5mM 피루브산 나트륨, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion 제품 번호 820400a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 5 mg/L 헤파린, 20 ng/mL bFGF, 20 마이크로그램/L EGF, 5 mg/L 인슐린, 100 mg/L 트랜스페린, 5.2 마이크로그램/L Na-셀레나이트, 6.3 마이크로그램/L 프로게스테론, 161.1 마이크로그램/L 푸트레스신, 50 mg/L 하이드로코르티손을 배지에 첨가하십시오.
재배양
구상체 배양을 하위 배양하려면 먼저 1000μl 필터 팁이 있는 에펜도르프 피펫을 사용하여 5~10회 위아래로 피펫팅하여 구상체를 기계적으로 해리합니다. 그런 다음 혼합물을 실온에서 300g으로 5분간 원심분리하여 세포를 펠릿화합니다. 상층액을 버리고 세포 펠렛을 새로운 배양 배지에 다시 부유시킵니다. 마지막으로 재부유된 세포를 새 배양 용기에 옮겨 구상체 형성을 촉진합니다. 이 접근 방식은 효율적인 구상체 분해를 보장하고 새로운 환경에서 계속 성장할 수 있도록 준비시킵니다
파종 밀도
1~2 × 10⁵ 세포/mL
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
세포가 동결 과정에서 최소 24시간에서 48시간 동안 회복될 때까지 기다리세요.
해동 및 배양

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로 50% 기저 배지 + 40% FBS + 10% DMSO 또는 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제를 포함하는 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

07기부자

기증자 연령
66년
민족
백인