İçeriğe atla
NCH421K Hücreler
Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma
Eş anlamlılar
NCH421k

NCH421K Hücreler

Cell line · Ürün numarası 300118

NCH421K, yetişkin bir hastadan alınan birincil glioblastom tümöründen türetilmiş, insan glioblastom kök hücre benzeri bir hücre hattıdır. Bu hücre hattı, bir ...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCH421K, yetişkin bir hastadan alınan birincil glioblastom tümöründen türetilmiş bir insan glioblastom kök hücre benzeri hücre hattıdır. Bu hücre hattı, kendini yenileme kapasitesi, çok potansiyelli olma ve tümör heterojenliğini yeniden oluşturma yeteneği dahil olmak üzere nöral kök hücrelerin temel özelliklerini koruyan tümör başlatıcı hücre sınıfına aittir. NCH421K hücreleri tipik olarak serumsuz koşullarda kültürlenir ve kök hücre benzeri glioma kültürlerinin bir özelliği olan yapışkan olmayan nörosferler olarak büyür. CD133 ve nestin gibi kanonik kök hücre belirteçlerini eksprese ederler, bu da glioblastom kök hücre benzeri bir model olarak sınıflandırılmalarını destekler.

NCH421K, kök hücre benzeri özelliklerin çoğalmasını ve korunmasını destekleyen bazik fibroblast büyüme faktörüne (bFGF) büyük ölçüde bağlı büyüme ve hayatta kalma gösterirken, epidermal büyüme faktörü (EGF) genişlemesi üzerinde minimum etkiye sahiptir. Hücreler, bFGF uyarımı altında kök hücre belirteçlerinin yüksek ekspresyonunu sürdürür ve in vivo olarak tümör oluşturma yeteneği gösterir, bu da tümör oluşturma potansiyellerini vurgular. Bu özellikleri nedeniyle NCH421K, glioblastom kök hücre biyolojisi, terapötik direnç, farklılaşma stratejileri ve tümör başlatıcı hücre popülasyonlarını ortadan kaldırmayı amaçlayan hedefe yönelik tedavilerin değerlendirilmesi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.

Bu hücre hattı, Christel Herold-Mende tarafından glioblastom dokusundan oluşturulmuştur.

Doku
Beyin
Hastalık
Glioblastoma
Eş anlamlılar
  • NCH421k

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Tümör oluşturucu
Evet
İki katına çıkma süresi
35 ila 40 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCH421K (Cytion katalog numarası 300118)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insülin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L Na-selenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putresin ve 50 mg/L hidrokortizon ekleyin.
Alt kültür oluşturma
Sferoid kültürleri alt kültüre almak için, 1000 μl filtre uçlu bir Eppendorf pipet kullanarak 5 ila 10 kez aşağı yukarı pipetleme yoluyla sferoidleri mekanik olarak ayırarak başlayın. Bundan sonra, hücreleri peletlemek için karışımı oda sıcaklığında 5 dakika boyunca 300g'de santrifüjleyin. Süpernatantı atın ve hücre peletini taze kültür ortamında yeniden süspanse edin. Son olarak, daha fazla sferoid oluşumunu teşvik etmek için yeniden süspanse edilen hücreleri yeni kültür kaplarına aktarın. Bu yaklaşım etkili sferoid parçalanmasını sağlar ve onları yeni bir ortamda sürekli büyümeye hazırlar
Ekim yoğunluğu
1 ila 2 x 105 hücre/ml
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Lütfen hücrelerin dondurma işleminden sonra en az 24 ila 48 saat kendine gelmesini bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, iyileşmeyi artırmak ve kriyo kaynaklı stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren %50 bazal ortam + %40 FBS + %10 DMSO veya CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
66 yıl
Etnik köken
Kafkas