NCH421K Hücreler
Cell line · Ürün numarası 300118
NCH421K, yetişkin bir hastadan alınan birincil glioblastom tümöründen türetilmiş, insan glioblastom kök hücre benzeri bir hücre hattıdır. Bu hücre hattı, bir ...
Kişiselleştirme / Öneriler
- NCH421K HücrelerCell line€800.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
NCH421K, yetişkin bir hastadan alınan birincil glioblastom tümöründen türetilmiş bir insan glioblastom kök hücre benzeri hücre hattıdır. Bu hücre hattı, kendini yenileme kapasitesi, çok potansiyelli olma ve tümör heterojenliğini yeniden oluşturma yeteneği dahil olmak üzere nöral kök hücrelerin temel özelliklerini koruyan tümör başlatıcı hücre sınıfına aittir. NCH421K hücreleri tipik olarak serumsuz koşullarda kültürlenir ve kök hücre benzeri glioma kültürlerinin bir özelliği olan yapışkan olmayan nörosferler olarak büyür. CD133 ve nestin gibi kanonik kök hücre belirteçlerini eksprese ederler, bu da glioblastom kök hücre benzeri bir model olarak sınıflandırılmalarını destekler.
NCH421K, kök hücre benzeri özelliklerin çoğalmasını ve korunmasını destekleyen bazik fibroblast büyüme faktörüne (bFGF) büyük ölçüde bağlı büyüme ve hayatta kalma gösterirken, epidermal büyüme faktörü (EGF) genişlemesi üzerinde minimum etkiye sahiptir. Hücreler, bFGF uyarımı altında kök hücre belirteçlerinin yüksek ekspresyonunu sürdürür ve in vivo olarak tümör oluşturma yeteneği gösterir, bu da tümör oluşturma potansiyellerini vurgular. Bu özellikleri nedeniyle NCH421K, glioblastom kök hücre biyolojisi, terapötik direnç, farklılaşma stratejileri ve tümör başlatıcı hücre popülasyonlarını ortadan kaldırmayı amaçlayan hedefe yönelik tedavilerin değerlendirilmesi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.
Bu hücre hattı, Christel Herold-Mende tarafından glioblastom dokusundan oluşturulmuştur.
- Doku
- Beyin
- Hastalık
- Glioblastoma
- Eş anlamlılar
- NCH421k
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Erkek
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Tümör oluşturucu
- Evet
- İki katına çıkma süresi
- 35 ila 40 saat
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- NCH421K (Cytion katalog numarası 300118)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Besiyerine 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insülin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L Na-selenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putresin ve 50 mg/L hidrokortizon ekleyin.
- Alt kültür oluşturma
- Sferoid kültürleri alt kültüre almak için, 1000 μl filtre uçlu bir Eppendorf pipet kullanarak 5 ila 10 kez aşağı yukarı pipetleme yoluyla sferoidleri mekanik olarak ayırarak başlayın. Bundan sonra, hücreleri peletlemek için karışımı oda sıcaklığında 5 dakika boyunca 300g'de santrifüjleyin. Süpernatantı atın ve hücre peletini taze kültür ortamında yeniden süspanse edin. Son olarak, daha fazla sferoid oluşumunu teşvik etmek için yeniden süspanse edilen hücreleri yeni kültür kaplarına aktarın. Bu yaklaşım etkili sferoid parçalanmasını sağlar ve onları yeni bir ortamda sürekli büyümeye hazırlar
- Ekim yoğunluğu
- 1 ila 2 x 105 hücre/ml
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Lütfen hücrelerin dondurma işleminden sonra en az 24 ila 48 saat kendine gelmesini bekleyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, iyileşmeyi artırmak ve kriyo kaynaklı stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren %50 bazal ortam + %40 FBS + %10 DMSO veya CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
07Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- 66 yıl
- Etnik köken
- Kafkas
08Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Üçüncü taraf sözleşmeleri geçerlidir
- Evet
