Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα NCH421K
Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Γλοιοβλάστωμα
Συνώνυμα
NCH421k

Έγγραφα

Κύτταρα NCH421K

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300118

Η NCH421K είναι μια κυτταρική σειρά ανθρώπινου γλοιοβλαστώματος τύπου βλαστικών κυττάρων, η οποία προέρχεται από πρωτογενή όγκο γλοιοβλαστώματος που λήφθηκε από ενήλικα ασθενή. Αυτή η κυτταρική σειρά ανήκει σε μια ...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Χαμηλά αποθέματα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η NCH421K είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά τύπου βλαστικών κυττάρων γλοιοβλαστώματος, η οποία προέρχεται από πρωτογενή όγκο γλοιοβλαστώματος που λήφθηκε από ενήλικα ασθενή. Αυτή η κυτταρική σειρά ανήκει σε μια κατηγορία κυττάρων που προκαλούν όγκους και διατηρούν βασικά χαρακτηριστικά των νευρικών βλαστικών κυττάρων, όπως την ικανότητα αυτοανανέωσης, την πολυδυναμικότητα και την ικανότητα να αναπαράγουν την ετερογένεια του όγκου. Τα κύτταρα NCH421K καλλιεργούνται συνήθως σε συνθήκες χωρίς ορό και αναπτύσσονται ως μη προσκολλημένες νευροσφαίρες, ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα των καλλιεργειών γλοιωμάτων τύπου βλαστικών κυττάρων. Εκφράζουν τυπικούς δείκτες βλαστικών κυττάρων, όπως CD133 και nestin, γεγονός που υποστηρίζει την ταξινόμησή τους ως μοντέλου τύπου βλαστικών κυττάρων γλοιοβλαστώματος.

Το NCH421K παρουσιάζει ανάπτυξη και επιβίωση που εξαρτώνται σε μεγάλο βαθμό από τον βασικό αυξητικό παράγοντα ινοβλαστών (bFGF), ο οποίος προάγει τον πολλαπλασιασμό και τη διατήρηση των χαρακτηριστικών που μοιάζουν με αυτά των βλαστικών κυττάρων, ενώ ο επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF) έχει ελάχιστη επίδραση στην επέκτασή του. Τα κύτταρα διατηρούν υψηλή έκφραση δεικτών βλαστικών κυττάρων υπό διέγερση από bFGF και επιδεικνύουν την ικανότητα να σχηματίζουν όγκους in vivo, υπογραμμίζοντας το ογκογόνο δυναμικό τους. Λόγω αυτών των ιδιοτήτων, το NCH421K χρησιμοποιείται ευρέως σε μελέτες της βιολογίας των βλαστικών κυττάρων του γλοιοβλαστώματος, της θεραπευτικής αντοχής, των στρατηγικών διαφοροποίησης και της αξιολόγησης στοχευμένων θεραπειών που αποσκοπούν στην εξάλειψη πληθυσμών κυττάρων που προκαλούν όγκους.

Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε από την Christel Herold-Mende από ιστό γλοιοβλαστώματος.

Ιστός
Εγκέφαλος
Ασθένεια
Γλοιοβλάστωμα
Συνώνυμα
  • NCH421k

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Ογκογόνος
Ναι
Χρόνος διπλασιασμού
35 έως 40 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NCH421K (αριθμός καταλόγου Cytion 300118)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_x910

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Προσθέστε στο μέσο 5 mg/L ηπαρίνης, 20 ng/mL bFGF, 20 μικρογραμμάρια/L EGF, 5 mg/L ινσουλίνης, 100 mg/L τρανσφερίνης, 5,2 μικρογραμμάρια/L Na-σεληνίτη, 6,3 μικρογραμμάρια/L προγεστερόνης, 161,1 μικρογραμμάρια/L πουτρεσκίνης, 50 mg/L υδροκορτιζόνης
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Για την υποκαλλιέργεια καλλιεργειών σφαιροειδών, ξεκινήστε με μηχανική διάσπαση των σφαιροειδών με σιφώνιο πάνω-κάτω 5 έως 10 φορές χρησιμοποιώντας μια πιπέτα Eppendorf με μύτες φίλτρου 1000 μl. Μετά από αυτό, φυγοκεντρίστε το μείγμα στα 300g για 5 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου για τη σφαιροποίηση των κυττάρων. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό και ανασυστήστε το κυτταρικό σφαιρίδιο σε φρέσκο μέσο καλλιέργειας. Τέλος, μεταφέρετε τα ανασυσταθέντα κύτταρα σε νέα δοχεία καλλιέργειας για να προωθήσετε τον περαιτέρω σχηματισμό σφαιροειδών. Η προσέγγιση αυτή εξασφαλίζει την αποτελεσματική διάσπαση των σφαιροειδών και τα προετοιμάζει για συνεχή ανάπτυξη σε νέο περιβάλλον
Πυκνότητα σποράς
1 έως 2 x 105 κύτταρα/ml
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Αφήστε τα κύτταρα να ανακάμψουν από τη διαδικασία κατάψυξης για τουλάχιστον 24 έως 48 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε 50% βασικό μέσο + 40% FBS + 10% DMSO ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
66 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος