Елементи NCH421K
Cell line · Номер товару 300118
NCH421K — це лінія клітин, схожих на стовбурові, гліобластоми людини, отримана з первинної пухлини гліобластоми, вилученої у дорослого пацієнта. Ця клітинна лінія належить до...
Налаштування / Рекомендації
- Елементи NCH421KCell line€800.00
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
01Загальна інформація
- Опис
NCH421K — це лінія клітин, схожих на стовбурові, гліобластоми людини, отримана з первинної пухлини гліобластоми, вилученої у дорослого пацієнта. Ця клітинна лінія належить до класу пухлинних ініціаторних клітин, які зберігають ключові ознаки нейральних стовбурових клітин, зокрема здатність до самовідновлення, мультипотентність та здатність відтворювати гетерогенність пухлини. Клітини NCH421K зазвичай культивують у безсироваткових умовах і ростуть у вигляді неадгезивних нейросфер, що є характерною ознакою культивувань гліом, схожих на стовбурові клітини. Вони експресують канонічні маркери стовбурових клітин, такі як CD133 та нестин, що підтверджує їхню класифікацію як моделі, схожої на стовбурові клітини гліобластоми.
NCH421K демонструє ріст і виживання, які сильно залежать від базового фактора росту фібробластів (bFGF), що сприяє проліферації та підтримці стовбуроподібних характеристик, тоді як епідермальний фактор росту (EGF) має мінімальний вплив на їх розширення. Клітини зберігають високу експресію маркерів стовбурових клітин під дією bFGF і демонструють здатність утворювати пухлини in vivo, що підкреслює їхній пухлиногенний потенціал. Завдяки цим властивостям NCH421K широко використовується в дослідженнях біології стовбурових клітин гліобластоми, резистентності до терапії, стратегій диференціації та оцінки цільових методів лікування, спрямованих на знищення популяцій клітин-ініціаторів пухлин.
Ця клітинна лінія була створена Крістель Герольд-Менде з тканини гліобластоми.
- Тканина
- Мозок
- Хвороба
- Гліобластома
- Синоніми
- NCH421k
02Класифікація
- Організм
- Людина
- Секс
- Чоловік
- Рівень біобезпеки
- 1
03Характеристики
- Пухлиноутворювальний
- Так
- Час подвоєння
- 35-40 годин
04Ідентифікатори
- Посилання
- NCH421K (номер за каталогом Cytion 300118)
- Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
- 9606
- Целозавр
- CVCL_x910
05Обробка та вирощування
- Живильне середовище
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
- Атмосфера інкубації
37°C, 5% CO2, волога атмосфера.
- Добавки
- Додайте до середовища 5 мг/л гепарину, 20 нг/мл bFGF, 20 мікрограмів/л EGF, 5 мг/л інсуліну, 100 мг/л трансферину, 5,2 мкг/л селеніту натрію, 6,3 мкг/л прогестерону, 161,1 мкг/л путресцину, 50 мг/л гідрокортизону
- Пересадка в нове середовище
- Для субкультивування культур сфероїдів почніть з механічної дисоціації сфероїдів шляхом піпетування вгору і вниз 5-10 разів за допомогою піпетки Еппендорфа з фільтрувальними насадками на 1000 мкл. Після цього центрифугуйте суміш при 300g протягом 5 хвилин при кімнатній температурі, щоб осадити клітини. Відкиньте надосадову рідину і ресуспендуйте осад клітин у свіжому живильному середовищі. Нарешті, перенесіть ресуспендовані клітини в нові культуральне середовище, щоб сприяти подальшому утворенню сфероїдів. Цей підхід забезпечує ефективне розщеплення сфероїдів і готує їх до подальшого росту в новому середовищі
- Щільність висіву
- 1 до 2 x 105 клітин/мл
- Оновлення рідини
- 2-3 рази на тиждень
- Відновлення після відлиги
- Будь ласка, дайте клітинам відновитися після процесу заморожування принаймні 24-48 годин.
- Розморожування та культивування
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контроль якості та кріоконсервація
- Стерильність
Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.
Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.
- Середовище для заморожування
- Як середовище кріоконсервування ми використовуємо 50% базальне середовище + 40% FBS + 10% ДМСО або СМ-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для покращення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
- Умови зберігання
Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.
- Умови доставки
Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.
07Донор
- Вік донора
- 66 років
- Етнічна приналежність
- Кавказець
08Правові питання та безпека
- Заходи безпеки
- Плануючи зберігати кріовіал у рідкому азоті для подальшого розморожування, обов'язково слід дотримуватися суворих заходів безпеки. Під час перенесення заморожених зразків до резервуара з рідким азотом або з нього необхідно використовувати захисні рукавички та одяг, а також маску або захисні окуляри. Це необхідно для того, щоб зменшити ризик травмування від потенційних кріогенних вибухів при вилученні, які можуть призвести до розльоту гострих осколків.
- Гарантія
У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту
Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>
- Діють угоди з третіми сторонами
- Так
