Ga naar de inhoud
NCH421K Cellen
Weefsel
Hersenen
Ziekte
Glioblastoom
Synoniemen
NCH421k

Documenten

NCH421K Cellen

Cell line · Productnummer 300118

NCH421K is een menselijke glioblastoom-stamcelachtige cellijn die is afgeleid van een primaire glioblastoomtumor die bij een volwassen patiënt is verwijderd. Deze cellijn behoort tot een ...

€800.00excl. btw en verzendkosten
Weinig op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

NCH421K is een menselijke glioblastoom-stamcelachtige cellijn die is afgeleid van een primaire glioblastoomtumor afkomstig van een volwassen patiënt. Deze cellijn behoort tot een klasse van tumorinitiërende cellen die belangrijke kenmerken van neurale stamcellen behouden, waaronder het vermogen tot zelfvernieuwing, multipotentie en het vermogen om tumorheterogeniteit na te bootsen. NCH421K-cellen worden doorgaans gekweekt onder serumvrije omstandigheden en groeien als niet-hechtende neurosferen, een kenmerk van stamcelachtige glioomculturen. Ze brengen canonieke stamcelmarkers tot expressie, zoals CD133 en nestine, wat hun classificatie als een glioblastoom-stamcelachtig model ondersteunt.

De groei en overleving van NCH421K zijn sterk afhankelijk van basische fibroblastgroeifactor (bFGF), die de proliferatie en het behoud van stamcelachtige kenmerken bevordert, terwijl epidermale groeifactor (EGF) een minimaal effect heeft op de expansie ervan. De cellen behouden een hoge expressie van stamcelmarkers onder bFGF-stimulatie en tonen het vermogen om in vivo tumoren te vormen, wat hun tumorogene potentieel benadrukt. Vanwege deze eigenschappen wordt NCH421K op grote schaal gebruikt in studies naar de biologie van glioblastoomstamcellen, therapeutische resistentie, differentiatiestrategieën en de evaluatie van gerichte behandelingen gericht op het uitroeien van tumorinitiërende celpopulaties.

Deze cellijn is door Christel Herold-Mende opgezet uit glioblastoomweefsel.

Weefsel
Hersenen
Ziekte
Glioblastoom
Synoniemen
  • NCH421k

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja
Verdubbelingstijd
35 tot 40 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCH421K (Cytion catalogusnummer 300118)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 5 mg/L heparine, 20 ng/mL bFGF, 20 microgram/L EGF, 5 mg/L insuline, 100 mg/L transferrine, 5,2 microgram/L natriumseleniet, 6,3 microgram/L progesteron, 161,1 microgram/L putrescine, 50 mg/L hydrocortison
Heruitplanten
Voor subcultuur sferoïde culturen, beginnen met het mechanisch scheiden van de sferoïden door pipetteren op en neer 5 tot 10 keer met behulp van een Eppendorf pipet met 1000 ul filtertips. Hierna centrifugeer je het mengsel bij 300g gedurende 5 minuten bij kamertemperatuur om de cellen te pelleteren. Gooi het supernatant weg en resuspendeer de celpellet in vers kweekmedium. Breng ten slotte de geresuspendeerde cellen over in nieuwe kweekvaten om verdere sferoïdvorming te bevorderen. Deze aanpak zorgt voor een efficiënte afbraak van de sferoïden en maakt ze klaar voor verdere groei in een nieuwe omgeving
Zaaidichtheid
1 tot 2 x 105 cellen/ml
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Laat de cellen minstens 24 tot 48 uur bijkomen van het invriesproces.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
66 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch