Gå direkte til indholdet
NCH421K-celler
Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom
Synonymer
NCH421k

Dokumenter

NCH421K-celler

Cell line · Varenummer 300118

NCH421K er en human glioblastom-stamcellelignende cellelinje, der stammer fra en primær glioblastomtumor, som er udtaget fra en voksen patient. Denne cellelinje tilhører en ...

€800.00ekskl. moms og fragt
Begrænset lagerbeholdning
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCH421K er en human glioblastom-stamcellelignende cellelinje, der stammer fra en primær glioblastomtumor fra en voksen patient. Denne cellelinje tilhører en klasse af tumorinitierende celler, der bevarer centrale egenskaber ved neurale stamceller, herunder evnen til selvfornyelse, multipotens og evnen til at gengive tumorens heterogenitet. NCH421K-celler dyrkes typisk under serumfrie betingelser og vokser som ikke-adhærente neurosfærer, hvilket er et kendetegn ved stamcellelignende gliomkulturer. De udtrykker kanoniske stamcellemarkører såsom CD133 og nestin, hvilket understøtter deres klassificering som en glioblastom-stamcellelignende model.

NCH421K udviser vækst og overlevelse, der er stærkt afhængig af basisk fibroblastvækstfaktor (bFGF), som fremmer proliferation og opretholdelse af stamcellelignende egenskaber, mens epidermal vækstfaktor (EGF) har minimal effekt på dens ekspansion. Cellerne opretholder en høj ekspression af stamcellemarkører under bFGF-stimulering og viser evnen til at danne tumorer in vivo, hvilket understreger deres tumorigeniske potentiale. På grund af disse egenskaber anvendes NCH421K i vid udstrækning i studier af glioblastom-stamcellebiologi, terapeutisk resistens, differentieringsstrategier og evaluering af målrettede behandlinger, der sigter mod at udrydde tumorinitierende cellepopulationer.

Denne cellelinje blev etableret af Christel Herold-Mende ud fra glioblastomvæv.

Væv
Hjerne
Sygdom
Glioblastom
Synonymer
  • NCH421k

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Tumorfremkaldende
Yeees
Fordoblingstid
35 til 40 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCH421K (Cytion katalognummer 300118)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt til mediet 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natriumselenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hydrokortison
Oddyrkning
For at subkultivere sfæroidkulturer skal du begynde med at adskille sfæroiderne mekanisk ved at pipettere op og ned 5 til 10 gange ved hjælp af en Eppendorf-pipette med 1000 μl filterspidser. Herefter centrifugeres blandingen ved 300 g i 5 minutter ved stuetemperatur for at pelleterer cellerne. Kassér supernatanten, og resuspender cellepelleten i frisk kulturmedium. Til sidst overføres de resuspenderede celler til nye dyrkningsbeholdere for at fremme yderligere sfæroiddannelse. Denne fremgangsmåde sikrer en effektiv nedbrydning af sfæroiderne og gør dem klar til fortsat vækst i et nyt miljø
Såtæthed
1 til 2 x 105 celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Lad cellerne komme sig efter nedfrysningen i mindst 24 til 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
66 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk