Buňky NCH421K
Cell line · Číslo výrobku 300118
NCH421K je lidská buněčná linie podobná kmenovým buňkám glioblastomu, odvozená z primárního nádoru glioblastomu odebraného u dospělého pacienta. Tato buněčná linie patří k...
Přizpůsobení / Doporučení
- Buňky NCH421KCell line€800.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
NCH421K je lidská buněčná linie podobná kmenovým buňkám glioblastomu, odvozená z primárního glioblastomu odebraného dospělému pacientovi. Tato buněčná linie patří do skupiny nádorových iniciujících buněk, které si zachovávají klíčové vlastnosti nervových kmenových buněk, včetně schopnosti sebeobnovy, multipotence a schopnosti reprodukovat nádorovou heterogenitu. Buňky NCH421K se obvykle kultivují v bezsérumových podmínkách a rostou jako neadhezivní neurosféry, což je charakteristický znak kmenových kultur gliomů. Exprimují kanonické markery kmenových buněk, jako jsou CD133 a nestin, což podporuje jejich klasifikaci jako modelu kmenových buněk glioblastomu.
NCH421K vykazuje růst a přežití, které jsou silně závislé na bazickém fibroblastovém růstovém faktoru (bFGF), který podporuje proliferaci a udržení kmenových charakteristik, zatímco epidermální růstový faktor (EGF) má na jeho expanzi minimální vliv. Buňky si při stimulaci bFGF udržují vysokou expresi markerů kmenových buněk a vykazují schopnost tvořit nádory in vivo, což podtrhuje jejich tumorigenní potenciál. Díky těmto vlastnostem je NCH421K široce využívána ve studiích biologie kmenových buněk glioblastomu, terapeutické rezistence, diferenciačních strategií a hodnocení cílených léčebných postupů zaměřených na eradikaci populací buněk iniciujících nádor.
Tuto buněčnou linii založila Christel Herold-Mende z tkáně glioblastomu.
- Tkáň
- Mozek
- Nemoc
- Glioblastom
- Synonyma
- NCH421k
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Muž
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Tumorogenní
- Ano
- Doba zdvojnásobení
- 35 až 40 hodin
04Identifikátory
- Citace
- NCH421K (katalogové číslo Cytion 300118)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Do média přidejte 5 mg/l heparinu, 20 ng/ml bFGF, 20 mikrogramů/l EGF, 5 mg/l inzulínu, 100 mg/l transferinu, 5,2 mikrogramu/l selenitu sodného, 6,3 mikrogramu/l progesteronu, 161,1 mikrogramu/l putrescinu a 50 mg/l hydrokortizonu
- Subkultivace
- Při subkultivaci sféroidních kultur začněte mechanickou disociací sféroidů pipetováním 5 až 10krát nahoru a dolů pomocí pipety Eppendorf s filtračními špičkami o objemu 1000 μl. Poté směs odstřeďte při 300 g po dobu 5 minut při pokojové teplotě, aby se buňky peletovaly. Supernatant zlikvidujte a buněčnou peletu znovu rozpusťte v čerstvém kultivačním médiu. Nakonec přeneste resuspendované buňky do nových kultivačních nádob, abyste podpořili další tvorbu sféroidů. Tento postup zajišťuje účinné rozdělení sféroidů a připravuje je na další růst v novém prostředí
- Hustota výsevu
- 1 až 2 x 105 buněk/ml
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- Nechte buňky po zmrazení alespoň 24 až 48 hodin zotavit.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
07Dárce
- Věk dárce
- 66 let
- Etnická příslušnost
- Kavkazský
08Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Platí smlouvy s třetími stranami
- Ano
