Células NCH421K

A NCH421K é uma linha celular humana semelhante a células estaminais de glioblastoma, derivada de um tumor primário de glioblastoma obtido de um doente adulto. Esta linha celular pertence a uma classe de células iniciadoras de tumores que mantêm características fundamentais das células estaminais neurais, incluindo a capacidade de auto-renovação, a multipotência e a capacidade de reproduzir a heterogeneidade tumoral. As células NCH421K são tipicamente cultivadas em condições sem soro e crescem como neuroesferas não aderentes, uma característica distintiva das culturas de glioma semelhantes a células estaminais. Elas expressam marcadores canónicos de células estaminais, tais como CD133 e nestina, o que corrobora a sua classificação como um modelo semelhante a células estaminais de glioblastoma.

O NCH421K apresenta crescimento e sobrevivência fortemente dependentes do fator de crescimento fibroblástico básico (bFGF), que promove a proliferação e a manutenção de características semelhantes às das células estaminais, enquanto o fator de crescimento epidérmico (EGF) tem um efeito mínimo na sua expansão. As células mantêm uma elevada expressão de marcadores de células estaminais sob estimulação com bFGF e demonstram a capacidade de formar tumores in vivo, destacando o seu potencial tumorigénico. Devido a estas propriedades, a NCH421K é amplamente utilizada em estudos sobre a biologia das células estaminais do glioblastoma, resistência terapêutica, estratégias de diferenciação e avaliação de tratamentos direcionados destinados a erradicar populações de células iniciadoras de tumores.

Esta linha celular foi estabelecida por Christel Herold-Mende a partir de tecido de glioblastoma.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia