Tartalomra ugrás
NCH421K sejtek
Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma
Szinonimák
NCH421k

Dokumentumok

NCH421K sejtek

Cell line · Termékszám 300118

Az NCH421K egy emberi glioblastoma őssejtszerű sejtvonal, amelyet egy felnőtt betegből eltávolított primer glioblastoma-daganatból nyertek ki. Ez a sejtvonal a …

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Kevés a készlet
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCH421K egy humán glioblastoma őssejtszerű sejtvonal, amelyet egy felnőtt betegtől származó primer glioblastoma-daganatból nyertek. Ez a sejtvonal a tumorkezdeményező sejtek csoportjába tartozik, amelyek megőrzik az idegőssejtek legfontosabb jellemzőit, ideértve az önmegújulási képességet, a multipotenciát és a tumor heterogenitásának reprodukálására való képességet. Az NCH421K sejteket általában szérummentes körülmények között tenyésztik, és nem tapadó neuroszférákként növekednek, ami a glioblastoma-szerű tenyészetek jellegzetes tulajdonsága. Kifejezik a kanonikus őssejtmarkereket, mint például a CD133 és a nestin, ami alátámasztja glioblastoma-szerű modellként való besorolásukat.

Az NCH421K növekedése és túlélése erősen függ a bazikus fibroblaszt növekedési faktortól (bFGF), amely elősegíti a szaporodást és az őssejtszerű jellemzők fenntartását, míg az epidermális növekedési faktor (EGF) minimális hatással van a sejtek szaporodására. A sejtek bFGF-stimuláció alatt magas szintű őssejtmarkerek expresszióját tartják fenn, és képesek in vivo tumorokat képezni, ami kiemeli tumorigenikus potenciáljukat. Ezen tulajdonságok miatt az NCH421K-t széles körben használják a glioblastoma őssejtbiológiájának, a terápiás rezisztenciának, a differenciálódási stratégiáknak, valamint a tumorkezdeményező sejtpopulációk felszámolására irányuló célzott kezelések értékelésének tanulmányozásában.

Ezt a sejtvonalat Christel Herold-Mende hozta létre glioblastoma szövetből.

Szövet
Agy
Betegség
Glioblastoma
Szinonimák
  • NCH421k

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Daganatképző
Igen
Kettőzési idő
35-40 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
NCH421K (Cytion katalógusszám 300118)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A tápközeget egészítsük ki 5 mg/L heparinnal, 20 ng/mL bFGF-fel, 20 mikrogramm/L EGF-fel, 5 mg/L inzulinnal, 100 mg/L transzferrinnel, 5,2 mikrogramm/L Na-szelenittal, 6,3 mikrogramm/L progeszteronnal, 161,1 mikrogramm/L putrescinnel, 50 mg/L hidrokortizonnal
Átültetés
A szferoidkultúrák szubkultiválásához kezdje a szferoidok mechanikus disszociációjával, 5-10 alkalommal történő fel-le pipettázással, 1000 μl-es szűrőhegyekkel ellátott Eppendorf pipettával. Ezt követően a sejtek pelletálásához centrifugálja az elegyet 300 g-nél 5 percig szobahőmérsékleten. Dobja el a felülúszót, és szuszpendálja újra a sejtpelletet friss táptalajban. Végül a reszuszpendált sejteket helyezze át új tenyésztőedényekbe a további szferoidképződés elősegítése érdekében. Ez a megközelítés biztosítja a szferoidok hatékony lebomlását, és felkészíti őket az új környezetben történő további növekedésre
Ültetési sűrűség
1–2 x 105 sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Kérjük, hagyja, hogy a sejtek legalább 24-48 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztás után.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
66 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi