Células NCH421K

A NCH421K é uma linhagem celular humana semelhante às células-tronco do glioblastoma, derivada de um tumor primário de glioblastoma obtido de um paciente adulto. Essa linhagem celular pertence a uma classe de células iniciadoras de tumor que mantêm características-chave das células-tronco neurais, incluindo capacidade de auto-renovação, multipotência e a capacidade de reproduzir a heterogeneidade tumoral. As células NCH421K são tipicamente cultivadas em condições sem soro e crescem na forma de neuroesferas não aderentes, uma característica marcante das culturas de glioma semelhantes a células-tronco. Elas expressam marcadores canônicos de células-tronco, como CD133 e nestina, o que corrobora sua classificação como um modelo de glioblastoma semelhante a células-tronco.

As células NCH421K apresentam crescimento e sobrevivência fortemente dependentes do fator de crescimento fibroblástico básico (bFGF), que promove a proliferação e a manutenção das características semelhantes às das células-tronco, enquanto o fator de crescimento epidérmico (EGF) tem efeito mínimo sobre sua expansão. As células mantêm alta expressão de marcadores de células-tronco sob estimulação com bFGF e demonstram a capacidade de formar tumores in vivo, destacando seu potencial tumorigênico. Devido a essas propriedades, a NCH421K é amplamente utilizada em estudos sobre a biologia das células-tronco do glioblastoma, resistência terapêutica, estratégias de diferenciação e avaliação de tratamentos direcionados que visam erradicar populações de células iniciadoras de tumor.

Essa linhagem celular foi estabelecida por Christel Herold-Mende a partir de tecido de glioblastoma.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.