תאי NCH421K
Cell line · Product number 300118
NCH421K is a human glioblastoma stem-like cell line derived from a primary glioblastoma tumor obtained from an adult patient. This cell line belongs to a ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
NCH421K הוא קו תאים דמוי-גזע של גליובלסטומה אנושית, שמקורו בגידול גליובלסטומה ראשוני שנלקח מחולה בוגר. קו תאים זה שייך לקבוצת תאים יוזמי-גידול השומרים על מאפיינים מרכזיים של תאי גזע עצביים, לרבות יכולת התחדשות עצמית, רב-פוטנציאליות, ויכולת לשחזר את ההטרוגניות של הגידול. תאי NCH421K מתורבתים בדרך כלל בתנאים נטולי סרום וגדלים כנוירוספרות לא דבקות, סימן היכר של תרבויות גליומה דמויות גזע. הם מבטאים סמנים קנוניים של תאי גזע כגון CD133 ו-nestin, התומכים בסיווגם כמודל דמוי גזע של גליובלסטומה.
NCH421K מפגין צמיחה והישרדות התלויות במידה רבה בגורם גדילה בסיסי של פיברובלסטים (bFGF), המקדמים התרבות ושימור של מאפיינים דמויי-גזע, בעוד שלגורם גדילה אפידרמלי (EGF) יש השפעה מינימלית על התפשטותו. התאים שומרים על ביטוי גבוה של סמני תאי גזע תחת גירוי של bFGF ומפגינים יכולת ליצור גידולים in vivo, מה שמדגיש את הפוטנציאל הטומורגני שלהם. בשל תכונות אלה, NCH421K נמצא בשימוש נרחב במחקרים על ביולוגיה של תאי גזע גליובלסטומה, עמידות טיפולית, אסטרטגיות התמיינות והערכת טיפולים ממוקדים שמטרתם חיסול אוכלוסיות תאים המייסדות גידולים.
קו תאים זה הוקם על ידי כריסטל הרולד-מנדה מרקמת גליובלסטומה.
- Tissue
- מוח
- Disease
- גליובלסטומה
- Synonyms
- NCH421k
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Tumourigenic
- כן
- Doubling time
- 35 עד 40 שעות
04Identifiers
- Citation
- NCH421K (מספר קטלוגי Cytion 300118)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- יש להוסיף למדיום 5 מ"ג/ל' הפרין, 20 ננוגרם/מ"ל bFGF, 20 מיקרוגרם/ל' EGF, 5 מ"ג/ליטר אינסולין, 100 מ"ג/ליטר טרנספרין, 5.2 מיקרוגרם/ליטר נתרן-סלניט, 6.3 מיקרוגרם/ליטר פרוגסטרון, 161.1 מיקרוגרם/ליטר פוטrescין, 50 מ"ג/ליטר הידרוקורטיזון
- Subculturing
- לצורך תרבית משנה של תרבויות כדוריות, יש להתחיל בפירוק מכני של הכדוריות באמצעות פיפטה Eppendorf עם קצות מסנן של 1000 μl, על ידי שאיבה כלפי מעלה ומטה 5 עד 10 פעמים. לאחר מכן, יש לסובב את התערובת בצנטריפוגה ב-300g למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר כדי להפריד את התאים. יש לשפוך את הנוזל העליון ולהחזיר את תאי התרבות למדיום תרבית טרי. לבסוף, העבירו את התאים המושעים מחדש לכלי תרבית חדשים כדי לקדם היווצרות נוספת של ספרואידים. גישה זו מבטיחה פירוק יעיל של הספרואידים ומכינה אותם להמשך צמיחה בסביבה חדשה
- Seeding density
- 1 עד 2 x 105 תאים/מ"ל
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- אנא המתן לפחות 24 עד 48 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 66 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Third-party agreements apply
- Yes
