Skip to content
תאי NCH421K
Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה
Synonyms
NCH421k

Documents

תאי NCH421K

Cell line · Product number 300118

NCH421K is a human glioblastoma stem-like cell line derived from a primary glioblastoma tumor obtained from an adult patient. This cell line belongs to a ...

US$800.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCH421K הוא קו תאים דמוי-גזע של גליובלסטומה אנושית, שמקורו בגידול גליובלסטומה ראשוני שנלקח מחולה בוגר. קו תאים זה שייך לקבוצת תאים יוזמי-גידול השומרים על מאפיינים מרכזיים של תאי גזע עצביים, לרבות יכולת התחדשות עצמית, רב-פוטנציאליות, ויכולת לשחזר את ההטרוגניות של הגידול. תאי NCH421K מתורבתים בדרך כלל בתנאים נטולי סרום וגדלים כנוירוספרות לא דבקות, סימן היכר של תרבויות גליומה דמויות גזע. הם מבטאים סמנים קנוניים של תאי גזע כגון CD133 ו-nestin, התומכים בסיווגם כמודל דמוי גזע של גליובלסטומה.

NCH421K מפגין צמיחה והישרדות התלויות במידה רבה בגורם גדילה בסיסי של פיברובלסטים (bFGF), המקדמים התרבות ושימור של מאפיינים דמויי-גזע, בעוד שלגורם גדילה אפידרמלי (EGF) יש השפעה מינימלית על התפשטותו. התאים שומרים על ביטוי גבוה של סמני תאי גזע תחת גירוי של bFGF ומפגינים יכולת ליצור גידולים in vivo, מה שמדגיש את הפוטנציאל הטומורגני שלהם. בשל תכונות אלה, NCH421K נמצא בשימוש נרחב במחקרים על ביולוגיה של תאי גזע גליובלסטומה, עמידות טיפולית, אסטרטגיות התמיינות והערכת טיפולים ממוקדים שמטרתם חיסול אוכלוסיות תאים המייסדות גידולים.

קו תאים זה הוקם על ידי כריסטל הרולד-מנדה מרקמת גליובלסטומה.

Tissue
מוח
Disease
גליובלסטומה
Synonyms
  • NCH421k

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
כן
Doubling time
35 עד 40 שעות

04Identifiers

Citation
NCH421K (מספר קטלוגי Cytion 300118)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
יש להוסיף למדיום 5 מ"ג/ל' הפרין, 20 ננוגרם/מ"ל bFGF, 20 מיקרוגרם/ל' EGF, 5 מ"ג/ליטר אינסולין, 100 מ"ג/ליטר טרנספרין, 5.2 מיקרוגרם/ליטר נתרן-סלניט, 6.3 מיקרוגרם/ליטר פרוגסטרון, 161.1 מיקרוגרם/ליטר פוטrescין, 50 מ"ג/ליטר הידרוקורטיזון
Subculturing
לצורך תרבית משנה של תרבויות כדוריות, יש להתחיל בפירוק מכני של הכדוריות באמצעות פיפטה Eppendorf עם קצות מסנן של 1000 μl, על ידי שאיבה כלפי מעלה ומטה 5 עד 10 פעמים. לאחר מכן, יש לסובב את התערובת בצנטריפוגה ב-300g למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר כדי להפריד את התאים. יש לשפוך את הנוזל העליון ולהחזיר את תאי התרבות למדיום תרבית טרי. לבסוף, העבירו את התאים המושעים מחדש לכלי תרבית חדשים כדי לקדם היווצרות נוספת של ספרואידים. גישה זו מבטיחה פירוק יעיל של הספרואידים ומכינה אותם להמשך צמיחה בסביבה חדשה
Seeding density
1 עד 2 x 105 תאים/מ"ל
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
אנא המתן לפחות 24 עד 48 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
66 שנים
Ethnicity
קווקזי