NCH421K-solut
Cell line · Tuotenumero 300118
NCH421K on ihmisen glioblastooman kantasolujen kaltainen solulinja, joka on peräisin aikuispotilaalta otetusta primaarisesta glioblastoomakasvaimesta. Tämä solulinja kuuluu...
Räätälöinti / Suositukset
- NCH421K-solutCell line€800.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
NCH421K on ihmisen glioblastooman kantasolujen kaltainen solulinja, joka on peräisin aikuispotilaalta otetusta primaarisesta glioblastoomakasvaimesta. Tämä solulinja kuuluu kasvaimia aloittavien solujen ryhmään, jotka säilyttävät hermokantasolujen keskeiset ominaisuudet, kuten itsensä uusiutumiskyvyn, monipotenssin ja kyvyn jäljitellä kasvaimen heterogeenisyyttä. NCH421K-soluja viljellään tyypillisesti seerumittomissa olosuhteissa, ja ne kasvavat tarttumattomina neurosfääreinä, mikä on tyypillistä kantasolumaisille glioomaviljelmille. Ne ilmentävät tyypillisiä kantasolumarkkereita, kuten CD133:a ja nestiniä, mikä tukee niiden luokittelua glioblastooman kantasolumaiseksi malliksi.
NCH421K:n kasvu ja eloonjääminen ovat vahvasti riippuvaisia perusfibroblastikasvutekijästä (bFGF), joka edistää proliferaatiota ja kantasolumaisien ominaisuuksien ylläpitämistä, kun taas epidermaalisella kasvutekijällä (EGF) on vain vähäinen vaikutus sen lisääntymiseen. Solut säilyttävät korkean kantasolumarkkerien ilmentymisen bFGF-stimulaation alaisina ja osoittavat kykyä muodostaa kasvaimia in vivo, mikä korostaa niiden tuumorigeenistä potentiaalia. Näiden ominaisuuksien ansiosta NCH421K:ta käytetään laajalti glioblastooman kantasolubiologian, terapeuttisen resistenssin, erilaistumisstrategioiden ja kasvaimen aloittavien solupopulaatioiden hävittämiseen tähtäävien kohdennettujen hoitojen arvioinnin tutkimuksissa.
Tämän solulinjan perusti Christel Herold-Mende glioblastoomakudoksesta.
- Kudos
- Aivot
- Sairaus
- Glioblastooma
- Synonyymit
- NCH421k
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä
- Kaksinkertaistumisaika
- 35-40 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- NCH421K (Cytionin luettelonumero 300118)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Lisää elatusaineeseen 5 mg/l hepariinia, 20 ng/ml bFGF:ää, 20 mikrogrammaa/l EGF:ää, 5 mg/l insuliinia, 100 mg/l transferriiniä, 5,2 mikrogrammaa/l natriumseleniittia, 6,3 mikrogrammaa/l progesteronia, 161,1 mikrogrammaa/l putreskiinia ja 50 mg/l hydrokortisonia.
- Soluviljely
- Sferoidiviljelmien subkulturointi aloitetaan dissosioimalla sferoidit mekaanisesti pipetoimalla 5-10 kertaa ylös ja alas käyttäen Eppendorf-pipettiä, jossa on 1000 μl:n suodatinkärjet. Tämän jälkeen seos sentrifugoidaan 300 g:n pyörimisnopeudella 5 minuutin ajan huoneenlämmössä solujen pelletöimiseksi. Hävitä supernatantti ja suspendoi solupelletti uudelleen tuoreeseen kasvatusmediumiin. Siirretään lopuksi resuspendoidut solut uusiin kasvatusastioihin, jotta edistetään sferoidien muodostumista. Tällä lähestymistavalla varmistetaan sferoidien tehokas hajoaminen ja valmistellaan ne jatkamaan kasvuaan uudessa ympäristössä
- Kylvötiheys
- 1–2 x 105 solua/ml
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Anna solujen toipua pakastuksesta vähintään 24-48 tuntia.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme 50 % perusmediaa + 40 % FBS + 10 % DMSO:ta eli CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytysstressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 66 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Sovelletaan kolmansien osapuolten kanssa tehtyjä sopimuksia
- Kyllä
