Langsung ke isi
Sel NCH421K
Tisu
Otak
Penyakit
Glioblastoma
Sinonim
NCH421k

Dokumen

Sel NCH421K

Cell line · Nomor produk 300118

NCH421K adalah garis sel glioblastoma manusia yang mirip sel induk, yang berasal dari tumor glioblastoma primer yang diambil dari seorang pasien dewasa. Garis sel ini termasuk dalam ...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Stok menipis
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

NCH421K adalah garis sel mirip sel induk glioblastoma manusia yang berasal dari tumor glioblastoma primer yang diambil dari seorang pasien dewasa. Garis sel ini termasuk dalam kelas sel pemicu tumor yang mempertahankan ciri-ciri utama sel induk saraf, termasuk kemampuan memperbarui diri, multipotensi, dan kemampuan untuk mereplikasi heterogenitas tumor. Sel NCH421K biasanya dikultur dalam kondisi bebas serum dan tumbuh sebagai neurosfer non-adhesi, yang merupakan ciri khas kultur glioma mirip sel punca. Sel-sel ini mengekspresikan penanda sel punca kanonik seperti CD133 dan nestin, yang mendukung klasifikasinya sebagai model mirip sel punca glioblastoma.

NCH421K menunjukkan pertumbuhan dan kelangsungan hidup yang sangat bergantung pada faktor pertumbuhan fibroblast dasar (bFGF), yang mendorong proliferasi dan pemeliharaan karakteristik mirip sel punca, sedangkan faktor pertumbuhan epidermal (EGF) memiliki efek minimal terhadap ekspansinya. Sel-sel ini mempertahankan ekspresi tinggi penanda sel punca di bawah stimulasi bFGF dan menunjukkan kemampuan untuk membentuk tumor in vivo, menyoroti potensi tumorigeniknya. Karena sifat-sifat ini, NCH421K banyak digunakan dalam studi biologi sel punca glioblastoma, resistensi terapeutik, strategi diferensiasi, dan evaluasi pengobatan bertarget yang bertujuan untuk memberantas populasi sel pemicu tumor.

Baris sel ini didirikan oleh Christel Herold-Mende dari jaringan glioblastoma.

Tisu
Otak
Penyakit
Glioblastoma
Sinonim
  • NCH421k

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Tumorigenik
Ya
Waktu penggandaan
35 hingga 40 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
NCH421K (Nomor katalog Cytion 300118)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan ke dalam medium 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natrium selenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hidrokortison
Perbanyakan sel
Untuk subkultur kultur spheroid, mulailah dengan memisahkan spheroid secara mekanis melalui pemipetan ke atas dan ke bawah sebanyak 5 hingga 10 kali menggunakan pipet Eppendorf dengan ujung filter 1000 μl. Setelah itu, sentrifugasi campuran tersebut pada 300g selama 5 menit pada suhu kamar untuk memecah sel. Buang supernatan dan resuspensi pelet sel dalam media kultur segar. Terakhir, pindahkan sel yang telah diresuspensi ke dalam bejana kultur baru untuk mendorong pembentukan sferoid lebih lanjut. Pendekatan ini memastikan pemecahan spheroid yang efisien dan mempersiapkan mereka untuk pertumbuhan berkelanjutan di lingkungan baru
Kepadatan penanaman
1 hingga 2 x 10⁵ sel/ml
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Biarkan sel pulih dari proses pembekuan setidaknya selama 24 hingga 48 jam.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan 50% media basal + 40% FBS + 10% DMSO, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
66 tahun
Etnis
Kaukasia