Skip to content
NCH421K เซลล์
Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Synonyms
NCH421k

Documents

NCH421K เซลล์

Cell line · Product number 300118

NCH421K is a human glioblastoma stem-like cell line derived from a primary glioblastoma tumor obtained from an adult patient. This cell line belongs to a ...

€800.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCH421K เป็นสายพันธุ์เซลล์ชนิดคล้ายเซลล์ต้นกำเนิดของเนื้องอกในสมองชนิดกลิโอบลาสโตมา ซึ่งได้มาจากเนื้องอกกลิโอบลาสโตมาปฐมภูมิในผู้ใหญ่ สายพันธุ์เซลล์นี้จัดอยู่ในกลุ่มเซลล์เริ่มต้นเนื้องอกที่ยังคงลักษณะสำคัญของเซลล์ต้นกำเนิดประสาท ได้แก่ ความสามารถในการแบ่งตัวเพื่อสร้างเซลล์ใหม่ (self-renewal) ความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์หลายชนิด (multipotency) และความสามารถในการจำลองความหลากหลายของเนื้องอก (tumor heterogeneity) เซลล์ NCH421K มักถูกเพาะเลี้ยงในสภาวะปราศจากซีรัมและเจริญเติบโตเป็นกลุ่มเซลล์ประสาททรงกลมที่ไม่เกาะติด ซึ่งเป็นลักษณะเด่นของการเพาะเลี้ยงเซลล์เนื้องอกในสมองชนิดกิลีโอมาที่มีลักษณะคล้ายเซลล์ต้นกำเนิด เซลล์เหล่านี้แสดงออกของตัวบ่งชี้เซลล์ต้นกำเนิดแบบดั้งเดิม เช่น CD133 และ nestin ซึ่งสนับสนุนการจัดประเภทให้เป็นแบบจำลองกิลีโอมาที่มีลักษณะคล้ายเซลล์ต้นกำเนิด

NCH421K แสดงการเจริญเติบโตและการอยู่รอดที่ขึ้นอยู่กับการกระตุ้นจากปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์พื้นฐาน (bFGF) อย่างมาก ซึ่งส่งเสริมการเพิ่มจำนวนและการคงอยู่ของลักษณะคล้ายเซลล์ต้นกำเนิด ในขณะที่ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF) มีผลน้อยมากต่อการขยายตัวของมัน เซลล์เหล่านี้ยังคงแสดงออกของตัวบ่งชี้เซลล์ต้นกำเนิดในระดับสูงภายใต้การกระตุ้นด้วย bFGF และแสดงให้เห็นความสามารถในการก่อตัวเป็นเนื้องอกในร่างกาย ซึ่งเน้นย้ำถึงศักยภาพในการก่อให้เกิดเนื้องอก ด้วยคุณสมบัติเหล่านี้ NCH421K จึงถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์ต้นกำเนิดในเนื้องอกสมองชนิดกลิโอบลาสโตมา ความต้านทานต่อการรักษา กลยุทธ์การเปลี่ยนสภาพ และการประเมินการรักษาแบบมุ่งเป้าที่มุ่งกำจัดประชากรเซลล์ต้นกำเนิดที่ก่อให้เกิดเนื้องอก

เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นโดย Christel Herold-Mende จากเนื้อเยื่อของเนื้องอกในสมองชนิดกลิโอบลาสโตมา

Tissue
สมอง
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Synonyms
  • NCH421k

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
ใช่
Doubling time
35 ถึง 40 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
NCH421K (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300118)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารเสริมลงในสื่อเพาะเลี้ยง ได้แก่ เฮปาริน 5 มก./ลิตร, bFGF 20 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, EGF 20 ไมโครกรัม/ลิตร, 5 mg/L อินซูลิน, 100 mg/L ทรานสเฟอร์ริน, 5.2 ไมโครกรัม/L Na-selenit, 6.3 ไมโครกรัม/L โปรเจสเตอโรน, 161.1 ไมโครกรัม/L พูเทรสซิน, 50 mg/L ไฮโดรคอร์ติโซน
Subculturing
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ทรงกลมแบบย่อย ให้เริ่มต้นด้วยการแยกเซลล์ออกจากกันทางกลไกโดยการดูดและปล่อยของเหลวขึ้นลง 5 ถึง 10 ครั้ง โดยใช้ปิเปต Eppendorf พร้อมปลายกรองขนาด 1000 μl หลังจากนั้น นำส่วนผสมไปปั่นเหวี่ยงที่ความเร็ว 300g เป็นเวลา 5 นาที ที่อุณหภูมิห้อง เพื่อให้เซลล์ตกตะกอน กำจัดส่วนใสที่ลอยอยู่ด้านบนทิ้ง แล้วนำไปแขวนลอยเซลล์ที่ตกตะกอนในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่สุดท้าย ให้ถ่ายโอนเซลล์ที่แขวนลอยกลับเข้าไปในภาชนะเพาะเลี้ยงใหม่เพื่อส่งเสริมการก่อตัวของก้อนเซลล์ทรงกลมต่อไป วิธีการนี้ช่วยให้การสลายตัวของก้อนเซลล์ทรงกลมมีประสิทธิภาพและเตรียมพร้อมสำหรับการเจริญเติบโตต่อไปในสภาพแวดล้อมใหม่
Seeding density
1 ถึง 2 x 10^5 เซลล์/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
กรุณาให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ถึง 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
66 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน