NCH421K-celler
Cell line · Produktnummer 300118
NCH421K är en mänsklig glioblastom-stamcellsliknande cellinje som härrör från en primär glioblastomtumör som erhållits från en vuxen patient. Denna cellinje tillhör en ...
Anpassning / Rekommendationer
- NCH421K-cellerCell line€800.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
NCH421K är en mänsklig glioblastomcellinje med stamcellsliknande egenskaper, härledd från en primär glioblastomtumör som erhållits från en vuxen patient. Denna cellinje tillhör en klass av tumörinitierande celler som behåller viktiga egenskaper hos neurala stamceller, däribland förmågan till självförnyelse, multipotens och förmågan att återskapa tumörens heterogenitet. NCH421K-celler odlas vanligtvis under serumfria förhållanden och växer som icke-vidhäftande neurosfärer, vilket är ett kännetecken för stamcellsliknande gliomkulturer. De uttrycker kanoniska stamcellsmarkörer såsom CD133 och nestin, vilket stöder deras klassificering som en glioblastomstamcellsliknande modell.
NCH421K uppvisar tillväxt och överlevnad som är starkt beroende av basisk fibroblasttillväxtfaktor (bFGF), vilket främjar proliferation och upprätthållande av stamcellsliknande egenskaper, medan epidermal tillväxtfaktor (EGF) har minimal effekt på dess expansion. Cellerna upprätthåller hög uttryck av stamcellsmarkörer under bFGF-stimulering och visar förmåga att bilda tumörer in vivo, vilket understryker deras tumörbildande potential. På grund av dessa egenskaper används NCH421K i stor utsträckning i studier av glioblastomstamcellsbiologi, terapeutisk resistens, differentieringsstrategier och utvärdering av riktade behandlingar som syftar till att utrota tumörinitierande cellpopulationer.
Denna cellinje etablerades av Christel Herold-Mende från glioblastomvävnad.
- Vävnad
- Hjärna
- Sjukdom
- Glioblastom
- Synonymer
- NCH421k
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Tumörframkallande
- Ja
- Fördubblingstid
- 35 till 40 timmar
04Identifierare
- Källa
- NCH421K (Cytion katalognummer 300118)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Tillsätt följande till odlingsmediet: 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natriumselenit, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hydrokortison
- Vidareodling
- För subkultur av sfäroidkulturer börjar man med att mekaniskt dissociera sfäroiderna genom att pipettera upp och ner 5-10 gånger med en Eppendorf-pipett med 1000 μl filterspetsar. Centrifugera därefter blandningen vid 300 g i 5 minuter vid rumstemperatur för att pelletera cellerna. Kassera supernatanten och resuspendera cellpelleten i färskt odlingsmedium. Överför slutligen de resuspenderade cellerna till nya odlingskärl för att främja ytterligare sfäroidbildning. Detta tillvägagångssätt säkerställer en effektiv nedbrytning av sfäroiderna och gör dem redo för fortsatt tillväxt i en ny miljö
- Såtäthet
- 1 till 2 x 105 celler/ml
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Låt cellerna återhämta sig från frysningsprocessen i minst 24 till 48 timmar.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Donatorns ålder
- 66 år
- Etnicitet
- Kaukasisk
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja
