Komórki NCH421K
Cell line · Numer produktu 300118
NCH421K to ludzka linia komórkowa o cechach komórek macierzystych glejaka wielopostaciowego, wyhodowana z pierwotnego guza glejaka wielopostaciowego pobranego od dorosłego pacjenta. Linia ta należy do...
Dostosowanie / Zalecenia
- Komórki NCH421KCell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
NCH421K to ludzka linia komórkowa o charakterze podobnym do komórek macierzystych glejaka wielopostaciowego, wyhodowana z pierwotnego guza glejaka wielopostaciowego pobranego od dorosłego pacjenta. Linia ta należy do klasy komórek inicjujących nowotwór, które zachowują kluczowe cechy komórek macierzystych układu nerwowego, w tym zdolność do samoodnawiania się, wielopotencjalność oraz zdolność do odtwarzania heterogenności nowotworu. Komórki NCH421K są zazwyczaj hodowane w warunkach bez surowicy i rosną jako nieprzylegające neurosfery, co jest cechą charakterystyczną hodowli komórek glejaka o charakterze komórek macierzystych. Ekspresja kanonicznych markerów komórek macierzystych, takich jak CD133 i nestina, potwierdza ich klasyfikację jako modelu komórek macierzystych glejaka wielopostaciowego.
Wzrost i przeżywalność komórek NCH421K są silnie uzależnione od podstawowego czynnika wzrostu fibroblastów (bFGF), który sprzyja proliferacji i utrzymaniu cech komórek macierzystych, podczas gdy czynnik wzrostu naskórka (EGF) ma minimalny wpływ na ich ekspansję. Komórki te utrzymują wysoką ekspresję markerów komórek macierzystych pod wpływem stymulacji bFGF i wykazują zdolność do tworzenia nowotworów in vivo, co podkreśla ich potencjał nowotworowy. Ze względu na te właściwości NCH421K jest szeroko stosowana w badaniach nad biologią komórek macierzystych glejaka wielopostaciowego, opornością na leczenie, strategiami różnicowania oraz w ocenie terapii celowanych mających na celu wyeliminowanie populacji komórek inicjujących nowotwór.
Linia komórkowa została założona przez Christel Herold-Mende z tkanki glejaka wielopostaciowego.
- Chusteczka
- Mózg
- Choroba
- Glejak wielopostaciowy
- Synonimy
- NCH421k
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Nowotworotwórczy
- Tak
- Czas podwojenia
- 35 do 40 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- NCH421K (numer katalogowy Cytion 300118)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Do pożywki należy dodać 5 mg/l heparyny, 20 ng/ml bFGF, 20 mikrogramów/l EGF, 5 mg/l insuliny, 100 mg/l transferyny, 5,2 mikrograma/l selenitu sodu, 6,3 mikrograma/l progesteronu, 161,1 mikrograma/l putrescyny, 50 mg/l hydrokortyzonu
- Hodowla komórek w subkulturze
- W przypadku subkulturowania kultur sferoidalnych, należy rozpocząć od mechanicznej dysocjacji sferoidów poprzez pipetowanie w górę i w dół od 5 do 10 razy przy użyciu pipety Eppendorf z końcówkami filtrującymi 1000 μl. Następnie odwirować mieszaninę z prędkością 300 g przez 5 minut w temperaturze pokojowej w celu osuszenia komórek. Odrzucić supernatant i ponownie zawiesić osad komórek w świeżym podłożu hodowlanym. Na koniec przenieś ponownie zawieszone komórki do nowych naczyń hodowlanych, aby promować dalsze tworzenie sferoidów. Takie podejście zapewnia skuteczny rozpad sferoid i przygotowuje je do dalszego wzrostu w nowym środowisku
- Gęstość wysiewu
- 1 do 2 x 105 komórek/ml
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Należy pozwolić komórkom na regenerację po procesie zamrażania przez co najmniej 24 do 48 godzin.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Wiek dawcy
- 66 lat
- Pochodzenie etniczne
- Kaukaski
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Obowiązują umowy z podmiotami zewnętrznymi
- Tak
