Prejsť na obsah
Bunky NCH421K
Tkanivo
Mozog
Choroba
Glioblastóm
Synonymá
NCH421k

Dokumenty

Bunky NCH421K

Cell line · Číslo výrobku 300118

NCH421K je ľudská bunková línia podobná kmeňovým bunkám glioblastómu, odvodená z primárneho glioblastómového nádoru odobratého dospelému pacientovi. Táto bunková línia patrí do...

€800.00bez DPH a poštovného
Nízke zásoby
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

NCH421K je ľudská bunková línia podobná kmeňovým bunkám glioblastómu, odvodená z primárneho glioblastómového nádoru odobratého dospelému pacientovi. Táto bunková línia patrí do triedy nádorových iniciujúcich buniek, ktoré si zachovávajú kľúčové vlastnosti neurálnych kmeňových buniek, vrátane schopnosti sebaregenerácie, multipotencie a schopnosti reprodukovať nádorovú heterogenitu. Bunky NCH421K sa zvyčajne kultivujú v bezsérumových podmienkach a rastú ako neadherentné neurosféry, čo je charakteristickým znakom kultúr kmeňových buniek gliómu. Exprimujú kanonické markery kmeňových buniek, ako sú CD133 a nestín, čo potvrdzuje ich klasifikáciu ako modelu kmeňových buniek glioblastómu.

NCH421K vykazuje rast a prežívanie, ktoré sú silne závislé od základného fibroblastového rastového faktoru (bFGF), ktorý podporuje proliferáciu a udržanie kmeňových charakteristík, zatiaľ čo epidermálny rastový faktor (EGF) má minimálny vplyv na jeho expanziu. Bunky si pri stimulácii bFGF zachovávajú vysokú expresiu markerov kmeňových buniek a preukazujú schopnosť tvoriť nádory in vivo, čo zdôrazňuje ich tumorigenický potenciál. Vďaka týmto vlastnostiam sa NCH421K široko používa v štúdiách biológie kmeňových buniek glioblastómu, terapeutickej rezistencie, stratégií diferenciácie a hodnotenia cielených liečebných postupov zameraných na eradikáciu populácií buniek iniciujúcich nádor.

Túto bunkovú líniu založila Christel Herold-Mende z tkaniva glioblastómu.

Tkanivo
Mozog
Choroba
Glioblastóm
Synonymá
  • NCH421k

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Tumorigenický
Áno
Doba zdvojnásobenia
35 až 40 hodín

04Identifikátory

Citácia
NCH421K (katalógové číslo Cytion 300118)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_x910

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Do živného média pridajte 5 mg/L heparínu, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogramov/L EGF, 5 mg/l inzulínu, 100 mg/l transferínu, 5,2 mikrogramov/l seleničnanu sodného, 6,3 mikrogramov/l progesterónu, 161,1 mikrogramov/l putrescínu a 50 mg/l hydrokortizónu
Rozmnožovanie kultúr
Pri subkultivácii sféroidných kultúr začnite mechanickou disociáciou sféroidov pipetovaním hore a dole 5 až 10-krát pomocou pipety Eppendorf s 1000 μl filtračnými špičkami. Potom zmes odstreďujte pri 300 g počas 5 minút pri izbovej teplote, aby sa bunky peletizovali. Supernatant zlikvidujte a pelety buniek znovu rozpusťte v čerstvom kultivačnom médiu. Nakoniec preneste resuspendované bunky do nových kultivačných nádob, aby ste podporili ďalšiu tvorbu sféroidov. Tento postup zabezpečuje účinný rozpad sféroidov a pripravuje ich na ďalší rast v novom prostredí
Hustota výsevu
1 až 2 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazovania aspoň 24 až 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 50 % bazálne médium + 40 % FBS + 10 % DMSO alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
66 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský