NCH421K-celler
Cell line · Produktnummer 300118
NCH421K er en stamcellelignende cellelinje fra humant glioblastom, avledet fra en primær glioblastom-svulst hentet fra en voksen pasient. Denne cellelinjen tilhører en ...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCH421K-cellerCell line€800.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
NCH421K er en menneskelig glioblastom-stamcellelignende cellelinje avledet fra en primær glioblastomtumor hentet fra en voksen pasient. Denne cellelinjen tilhører en klasse av tumorinitierende celler som beholder sentrale egenskaper ved nevrale stamceller, herunder evnen til selvfornyelse, multipotens og evnen til å gjenskape tumorheterogenitet. NCH421K-celler dyrkes vanligvis under serumfrie forhold og vokser som ikke-adherente nevrosfærer, et kjennetegn ved stamcellelignende gliomkulturer. De uttrykker kanoniske stamcellemarkører som CD133 og nestin, noe som støtter klassifiseringen av dem som en glioblastom-stamcellelignende modell.
NCH421K viser vekst og overlevelse som er sterkt avhengig av basisk fibroblastvekstfaktor (bFGF), som fremmer spredning og opprettholdelse av stamcellelignende egenskaper, mens epidermal vekstfaktor (EGF) har minimal effekt på utvidelsen. Cellene opprettholder høy ekspresjon av stamcellemarkører under bFGF-stimulering og viser evne til å danne svulster in vivo, noe som understreker deres tumorigeniske potensial. På grunn av disse egenskapene er NCH421K mye brukt i studier av glioblastom-stamcellebiologi, terapeutisk resistens, differensieringsstrategier og evaluering av målrettede behandlinger rettet mot å utrydde tumorinitierende cellepopulasjoner.
Denne cellelinjen ble etablert av Christel Herold-Mende fra glioblastomvev.
- Vev
- Hjerne
- Sykdom
- Glioblastom
- Synonymer
- NCH421k
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Tumorinduserende
- Ja
- Fordoblingstid
- 35 til 40 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NCH421K (Cytion-katalognummer 300118)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_x910
05Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Tilsett 5 mg/L heparin, 20 ng/mL bFGF, 20 mikrogram/L EGF, 5 mg/L insulin, 100 mg/L transferrin, 5,2 mikrogram/L natriumselenitt, 6,3 mikrogram/L progesteron, 161,1 mikrogram/L putrescin, 50 mg/L hydrokortison
- Subkultivering
- For subkulturer av sfæroidkulturer begynner du med å dissosiere sfæroidene mekanisk ved å pipettere opp og ned 5 til 10 ganger med en Eppendorf-pipette med 1000 μl filterspisser. Deretter sentrifugeres blandingen ved 300 g i 5 minutter ved romtemperatur for å pelletere cellene. Kast supernatanten, og resuspender cellepelleten i nytt dyrkingsmedium. Overfør til slutt de resuspenderte cellene til nye dyrkningsbeholdere for å fremme ytterligere sfæroiddannelse. Denne fremgangsmåten sikrer effektiv nedbrytning av sfæroidene og gjør dem klare for fortsatt vekst i et nytt miljø
- Såtetthet
- 1 til 2 x 105 celler/ml
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
- La cellene restituere seg fra fryseprosessen i minst 24 til 48 timer.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
07Donor
- Donorens alder
- 66 år
- Etnisitet
- Kaukasisk
08Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtaler med tredjeparter gjelder
- Ja
