Skip to content
A9
Tissue
רקמת חיבור תת-עורית, רקמת חיבור רופפת ושומן, נורמלי
Synonyms
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Documents

A9

Cell line · Product number 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי A9 הם קו תאים דמוי פיברובלסטים שמקורם ברקמת שומן של עכברים. הם הוקמו כקלונו של זן L929 ההורי על ידי W. R. Earle בשנת 1940. הזן ההורי הושג מרקמת שומן תת-עורית תקינה של עכבר C3H/An זכר.

מאפיין בולט של תאים אלה הוא שהם מבטאים אדנוזין פוספוריבוזיל טרנספראז (APRT) והיפוקסנתין פוספוריבוזיל טרנספראז (HPRT), המסומנים כ-APRT+ ו-HPRT+. תאים אלה היו בעלי ערך רב במחקרים על נגיפים, במיוחד נגיף הפסאודורביס (PRV), נגיף סטומטיטיס וסיקולרי (VSV) מזן אינדיאנה ונגיף הרפס סימפלקס (HSV).

הרגישות והתגובה של תאי A9 לנגיפים אלה הפכו אותם לשימושיים במחקר של שכפול נגיפי, פתוגנזה וטיפולים אנטי-נגיפיים פוטנציאליים. באימונולוגיה, תאי A9 משמשים בתחומים מחקריים שונים. הם מהווים מודל חשוב לחקר תגובות חיסוניות, ייצור נוגדנים, יצירת נוגדנים מונוקלונליים וטכנולוגיית היברידומה.

בשל התרבותם המהירה (זמן הכפלה של כ-24 שעות), תאי A9 מספקים אספקה מספקת של תאים לניסויים ויישומים במורד הזרם. לתאי A9 מורפולוגיה דמוית פיברובלסט והם נדבקים למצע התרבית. תאי A9, המסווגים כתאים של בעלי חיים ומשתייכים לסוג התאים היברידומה, נוצרו על ידי מיזוג לימפוציטים B מ-Mus musculus (עכבר) עם תאי מיאלומה מאותו המין.

שילוב ייחודי זה מאפשר לתאי A9 להפגין תכונות של לימפוציטים B ושל תאי מיאלומה כאחד. בסך הכל, תאי A9 הם קו תאים דמוי פיברובלסט מבוסס היטב, המשמש לחקר זיהומים נגיפיים, במיוחד PRV, VSV ו-HSV, וכן בתחום האימונולוגיה.

Tissue
רקמת חיבור תת-עורית, רקמת חיבור רופפת ושומן, נורמלי
Synonyms
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים.

04Identifiers

Citation
A9 (מספר קטלוג Cytion 305166)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2k

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
C3H/An
Donor age
100 ימים