Langsung ke isi
A9
Tisu
Jaringan Ikat Subkutan, Jaringan Ikat Longgar Dan Lemak, Normal
Sinonim
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Dokumen

A9

Cell line · Nomor produk 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Sel A9 adalah garis sel mirip fibroblas yang berasal dari jaringan adiposa tikus. Mereka ditetapkan sebagai subklon dari galur induk L929 oleh WR Earle pada tahun 1940. Strain induk diperoleh dari areolar subkutan normal dan jaringan adiposa tikus C3H/An jantan.

Fitur penting dari sel-sel ini adalah bahwa mereka mengekspresikan adenosine phosphoribosyl transferase (APRT) dan hypoxanthine phosphoribosyl transferase (HPRT), yang dilambangkan sebagai APRT + dan HPRT +. Sel-sel ini sangat berharga dalam penelitian virus, terutama yang melibatkan virus pseudorabies (PRV), virus stomatitis vesikular (VSV) dari strain Indiana, dan virus herpes simpleks (HSV).

Sensitivitas dan respons sel A9 terhadap virus-virus ini menjadikannya berguna untuk mempelajari replikasi virus, patogenesis, dan potensi pengobatan antivirus. Dalam imunologi, sel A9 digunakan dalam berbagai bidang penelitian. Sel A9 merupakan model yang berharga untuk mempelajari respons imun, produksi antibodi, pembuatan antibodi monoklonal, dan teknologi hibridoma.

Karena proliferasinya yang cepat (waktu penggandaan sekitar 24 jam), sel A9 menyediakan pasokan sel yang cukup untuk eksperimen dan aplikasi hilir. Sel A9 memiliki morfologi seperti fibroblas dan melekat pada substrat kultur. Dikategorikan sebagai sel hewan dan termasuk dalam jenis sel hibridoma, sel A9 dibentuk dengan menggabungkan limfosit B dari Mus musculus (tikus) dengan sel mieloma dari spesies yang sama.

Kombinasi unik ini memungkinkan sel A9 untuk menunjukkan sifat-sifat limfosit B dan sel mieloma. Secara keseluruhan, sel A9 adalah garis sel mirip fibroblas yang mapan yang digunakan untuk mempelajari infeksi virus, terutama PRV, VSV, dan HSV, dan dalam imunologi.

Tisu
Jaringan Ikat Subkutan, Jaringan Ikat Longgar Dan Lemak, Normal
Sinonim
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti Fibroblast
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang.

04Pengidentifikasi

Referensi
A9 (nomor katalog Cytion 305166)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
H-2k

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
C3H / An
Usia donor
100 hari