A9

Las células A9 son una línea celular de tipo fibroblástico derivada del tejido adiposo de ratón. Fueron establecidas como un subclon de la cepa parental L929 por W. R. Earle en 1940. La cepa parental se obtuvo a partir de tejido areolar y adiposo subcutáneo normal de un ratón macho C3H/An.

Una característica notable de estas células es que expresan adenosina fosforibosiltransferasa (APRT) e hipoxantina fosforibosiltransferasa (HPRT), denominadas APRT+ y HPRT+. Estas células han resultado valiosas en estudios sobre virus, en particular los relacionados con el virus de la pseudorrabia (PRV), el virus de la estomatitis vesicular (VSV) de la cepa Indiana y el virus del herpes simple (HSV).

La sensibilidad y la respuesta de las células A9 a estos virus las han convertido en un recurso útil para estudiar la replicación viral, la patogénesis y los posibles tratamientos antivirales. En inmunología, las células A9 se utilizan en diversas áreas de investigación. Constituyen un modelo valioso para estudiar las respuestas inmunitarias, la producción de anticuerpos, la generación de anticuerpos monoclonales y la tecnología de hibridomas.

Debido a su rápida proliferación (tiempo de duplicación de aproximadamente 24 horas), las células A9 proporcionan un suministro celular suficiente para experimentos y aplicaciones posteriores. Las células A9 tienen una morfología similar a la de los fibroblastos y se adhieren al sustrato de cultivo. Clasificadas como células animales y pertenecientes al tipo de células de hibridoma, las células A9 se formaron mediante la fusión de linfocitos B de Mus musculus (ratón) con células de mieloma de la misma especie.

Esta combinación única permite que las células A9 presenten propiedades tanto de los linfocitos B como de las células de mieloma. En general, las células A9 son una línea celular de tipo fibroblástico bien establecida que se utiliza para estudiar infecciones virales, especialmente el PRV, el VSV y el HSV, así como en inmunología.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.