
- Tissue
- 皮下結締組織、鬆弛結締組織及脂肪,正常
- Synonyms
- A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B
Documents
A9
Cell line · Product number 305166
A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...
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01General information
- Description
A9 細胞是一種源自小鼠脂肪組織的成纖維細胞樣細胞系。該細胞系由 W. R. Earle 於 1940 年以 L929 親本株的亞克隆形式建立。該親本株取自一隻雄性 C3H/An 小鼠的正常皮下疏鬆組織及脂肪組織。
這些細胞的一大顯著特徵在於其會表達腺苷磷核糖轉移酶(APRT)和次黃嘌呤磷核糖轉移酶(HPRT),因此被標示為 APRT+ 和 HPRT+。 這些細胞在病毒研究中具有重要價值,特別是涉及偽狂犬病毒(PRV)、印第安納株水疱性口炎病毒(VSV)以及單純疱疹病毒(HSV)的研究。
A9 細胞對這些病毒的敏感性與反應,使其成為研究病毒複製、致病機制及潛在抗病毒治療的理想工具。在免疫學領域,A9 細胞被應用於各種研究範疇。它們是研究免疫反應、抗體產生、單克隆抗體製備以及雜交瘤技術的寶貴模型。
由於其增殖迅速(倍增時間約為 24 小時),A9 細胞能為實驗及後續應用提供充足的細胞來源。A9 細胞具有成纖維細胞般的形態,並會附著於培養基質上。 A9 細胞歸類為動物細胞,屬於雜交瘤細胞類型,是由小鼠(Mus musculus)的 B 淋巴細胞與同物種的骨髓瘤細胞融合而形成。
這種獨特的組合使 A9 細胞同時具備 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的特性。總體而言,A9 細胞是一種成熟的成纖維細胞樣細胞系,廣泛應用於研究病毒感染(尤其是豬繁殖與呼吸綜合症病毒、水痘帶狀疱疹病毒及人類疱疹病毒)以及免疫學領域。
- Tissue
- 皮下結締組織、鬆弛結締組織及脂肪,正常
- Synonyms
- A-9
- A9 (Hamprecht)
- A9(Hamprecht)
- AG 9
- GM00346
- GM-346
- GM346
- GM00346B
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纖維細胞樣
- Tumourigenic
- 是的,在裸鼠身上。
04Identifiers
- Citation
- A9(Cytion 型號 305166)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3984
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- H-2k
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Breed / subspecies
- C3H/An
- Donor age
- 100 天
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes