Gå til innholdet
A9
Vev
Subkutant bindevev, løst bindevev og fett, normalt
Synonymer
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Dokumenter

A9

Cell line · Produktnummer 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

A9-celler er en fibroblastlignende cellelinje som stammer fra fettvev fra mus. De ble etablert som en subklon av foreldrestammen L929 av W. R. Earle i 1940. Foreldrestammen ble utvunnet fra normalt subkutant areolært vev og fettvev fra en hannmus av rasen C3H/An.

Et bemerkelsesverdig trekk ved disse cellene er at de uttrykker adenosin fosforibosyltransferase (APRT) og hypoksantin fosforibosyltransferase (HPRT), som betegnes som APRT+ og HPRT+. Disse cellene har vært verdifulle i virusstudier, særlig med pseudorabiesvirus (PRV), vesikulært stomatittvirus (VSV) av Indiana-stammen og herpes simplex-virus (HSV).

A9-cellenes følsomhet og respons på disse virusene har gjort dem nyttige for studier av virusreplikasjon, patogenese og potensielle antivirale behandlinger. Innen immunologi brukes A9-celler på en rekke forskningsområder. De er en verdifull modell for å studere immunresponser, antistoffproduksjon, generering av monoklonale antistoffer og hybridomteknologi.

På grunn av den raske proliferasjonen (fordoblingstid på ca. 24 timer) gir A9-celler tilstrekkelig med celler til eksperimenter og nedstrømsapplikasjoner. A9-celler har en fibroblastlignende morfologi og fester seg til dyrkingssubstratet. A9-celler, som kategoriseres som dyreceller og tilhører celletypen hybridom, ble dannet ved å fusjonere B-lymfocytter fra Mus mus musculus (mus) med myelomceller fra samme art.

Denne unike kombinasjonen gjør at A9-celler har egenskaper fra både B-lymfocytter og myelomceller. A9-celler er en veletablert fibroblastlignende cellelinje som brukes til å studere virusinfeksjoner, spesielt PRV, VSV og HSV, og i immunologi.

Vev
Subkutant bindevev, løst bindevev og fett, normalt
Synonymer
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A9 (Cytion-katalognummer 305166)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
H-2k

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C3H/An
Donorens alder
100 dager