Премини към съдържанието
A9
Тъкан
Подкожна съединителна тъкан, свободна съединителна тъкан и мазнини, нормална
Синоними
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Документи

A9

Cell line · Номер на продукта 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките А9 са фибробластоподобна клетъчна линия, получена от мастна тъкан на мишка. Те са създадени като подклон на родителския щам L929 от У. Р. Ерл през 1940 г. Родителският щам е получен от нормална подкожна ареоларна и мастна тъкан на мъжка мишка C3H/An.

Забележителна особеност на тези клетки е, че те експресират аденозин фосфорибозилтрансфераза (APRT) и хипоксантин фосфорибозилтрансфераза (HPRT), обозначени като APRT+ и HPRT+. Тези клетки са ценни при изследванията на вируси, особено на вируса на псевдочумата (PRV), вируса на везикуларния стоматит (VSV) от щама Индиана и вируса на обикновения херпес (HSV).

Чувствителността и реакцията на клетките A9 към тези вируси ги прави полезни за изучаване на вирусната репликация, патогенезата и потенциалните антивирусни лечения. В имунологията клетките A9 се използват в различни области на изследване. Те са ценен модел за изучаване на имунните реакции, производството на антитела, генерирането на моноклонални антитела и хибридомната технология.

Поради бързата им пролиферация (удвояване за около 24 часа), клетките А9 осигуряват достатъчен брой клетки за експерименти и приложения надолу по веригата. Клетките A9 имат морфология, подобна на фибробласт, и се придържат към субстрата за култивиране. Категоризирани като животински клетки и принадлежащи към хибридомния клетъчен тип, клетките А9 са образувани чрез сливане на В лимфоцити от Mus musculus (мишка) с миеломни клетки от същия вид.

Тази уникална комбинация позволява на клетките A9 да проявяват свойства както на В лимфоцитите, така и на миеломните клетки. Като цяло клетките A9 са добре установена фибробластоподобна клетъчна линия, използвана за изучаване на вирусни инфекции, особено PRV, VSV и HSV, и в имунологията.

Тъкан
Подкожна съединителна тъкан, свободна съединителна тъкан и мазнини, нормална
Синоними
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Туморогенен
Да, при голи мишки.

04Идентификатори

Източник
A9 (каталожен номер на Cytion 305166)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_3984

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
H-2k

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
C3H/An
Възраст на донора
100 дни