
- Gewebe
- Subkutanes Bindegewebe, loses Bindegewebe und Fett, normal
- Synonyme
- A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B
Dokumente
A9
Cell line · Artikelnummer 305166
A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...
Anpassung / Empfehlungen
- A9Cell line€550.00
Empfohlen (frischeste Charge)
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
A9-Zellen sind eine fibroblastenähnliche Zelllinie, die aus dem Fettgewebe der Maus gewonnen wird. Sie wurden 1940 von W. R. Earle als Subklon des Elternstamms L929 etabliert. Der Elternstamm wurde aus normalem subkutanem areolären und adipösem Gewebe einer männlichen C3H/An-Maus gewonnen.
Ein bemerkenswertes Merkmal dieser Zellen ist, dass sie Adenosin-Phosphoribosyl-Transferase (APRT) und Hypoxanthin-Phosphoribosyl-Transferase (HPRT) exprimieren, die als APRT+ und HPRT+ bezeichnet werden. Diese Zellen haben sich bei der Untersuchung von Viren bewährt, insbesondere des Pseudorabies-Virus (PRV), des vesikulären Stomatitis-Virus (VSV) des Indiana-Stammes und des Herpes-simplex-Virus (HSV).
Die Empfindlichkeit der A9-Zellen und ihre Reaktion auf diese Viren haben sie für die Untersuchung der viralen Replikation, der Pathogenese und möglicher antiviraler Behandlungen nützlich gemacht. In der Immunologie werden A9-Zellen in verschiedenen Forschungsbereichen eingesetzt. Sie sind ein wertvolles Modell für die Untersuchung von Immunreaktionen, der Antikörperproduktion, der Herstellung monoklonaler Antikörper und der Hybridomtechnologie.
Aufgrund ihrer schnellen Vermehrung (Verdopplungszeit von etwa 24 Stunden) bieten A9-Zellen einen ausreichenden Zellvorrat für Experimente und nachgeschaltete Anwendungen. A9-Zellen haben eine fibroblastenähnliche Morphologie und haften am Kultursubstrat. A9-Zellen, die als tierische Zellen eingestuft werden und zum Hybridom-Zelltyp gehören, entstanden durch die Fusion von B-Lymphozyten aus Mus musculus (Maus) mit Myelomzellen derselben Spezies.
Dank dieser einzigartigen Kombination weisen A9-Zellen Eigenschaften sowohl von B-Lymphozyten als auch von Myelomzellen auf. Insgesamt sind A9-Zellen eine gut etablierte fibroblastenähnliche Zelllinie, die zur Untersuchung von Virusinfektionen, insbesondere PRV, VSV und HSV, und in der Immunologie eingesetzt wird.
- Gewebe
- Subkutanes Bindegewebe, loses Bindegewebe und Fett, normal
- Synonyme
- A-9
- A9 (Hamprecht)
- A9(Hamprecht)
- AG 9
- GM00346
- GM-346
- GM346
- GM00346B
02Klassifizierung
- Organismus
- Maus
- Sex
- Männlich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Fibroblasten-ähnlich
- Tumorauslösend
- Ja, an nackten Mäusen.
04Bezeichner
- Quellenangabe
- A9 (Cytion Katalognummer 305166)
- NCBI-Steuer-ID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3984
05Expression und Anfälligkeit
- Antigenexpression
- H-2k
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Rasse / Unterart
- C3H/An
- Alter des Spenders
- 100 Tage
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja