Pereiti prie turinio
A9
Audinys
Poodinis jungiamasis audinys, laisvas jungiamasis audinys ir riebalai, normalus
Sinonimai
A-9, A9 (Hamprecht), A9(Hamprecht), AG 9, GM00346, GM-346, GM346, GM00346B

Dokumentai

A9

Cell line · Prekės numeris 305166

A9 cells are a fibroblast-like cell line derived from mouse adipose tissue. They were established as a subclone of the L929 parent strain by W. R. Earle i...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

A9 ląstelės yra fibroblastų tipo ląstelių linija, gauta iš pelių riebalinio audinio. Jas kaip L929 motininės padermės subkloną 1940 m. sukūrė W. R. Earle'as. Tėvinė padermė buvo gauta iš normalaus C3H/An pelių patinų poodinio areolinio ir riebalinio audinio.

Šios ląstelės pasižymi tuo, kad jos ekspresuoja adenozino fosforibozil transferazę (APRT) ir hipoksantino fosforibozil transferazę (HPRT), žymimas APRT+ ir HPRT+. Šios ląstelės buvo vertingos atliekant virusų tyrimus, ypač susijusius su pseudorabies virusu (PRV), Indianos padermės vezikulinio stomatito virusu (VSV) ir paprastojo herpeso virusu (HSV).

A9 ląstelių jautrumas ir atsakas į šiuos virusus tapo naudingas tiriant virusų replikaciją, patogenezę ir galimą antivirusinį gydymą. Imunologijoje A9 ląstelės naudojamos įvairiose tyrimų srityse. Jos yra vertingas imuninių reakcijų, antikūnų gamybos, monokloninių antikūnų gamybos ir hibridomų technologijos tyrimo modelis.

Dėl spartaus dauginimosi (padvigubėjimo trukmė - maždaug 24 valandos) A9 ląstelės užtikrina pakankamą ląstelių kiekį eksperimentams ir tolesniam naudojimui. A9 ląstelių morfologija panaši į fibroblastų ir jos prilimpa prie kultūrų substrato. A9 ląstelės, priskiriamos gyvūninėms ląstelėms ir priklausančios hibridomų ląstelių tipui, buvo suformuotos sujungus Mus musculus (pelės) B limfocitus su tos pačios rūšies mielominėmis ląstelėmis.

Šis unikalus derinys leidžia A9 ląstelėms turėti ir B limfocitų, ir mielominių ląstelių savybių. Apskritai A9 ląstelės yra gerai žinoma į fibroblastus panaši ląstelių linija, naudojama virusinėms infekcijoms, ypač PRV, VSV ir HSV, tirti ir imunologijoje.

Audinys
Poodinis jungiamasis audinys, laisvas jungiamasis audinys ir riebalai, normalus
Sinonimai
  • A-9
  • A9 (Hamprecht)
  • A9(Hamprecht)
  • AG 9
  • GM00346
  • GM-346
  • GM346
  • GM00346B

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms.

04Identifikatoriai

Nuoroda
A9 (Cytion katalogo numeris 305166)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_3984

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
H-2k

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
C3H/An
Donoro amžius
100 dienų